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背景玛咖是十字花科(Brassicaceae)独行菜属一年或两年生草本植物Lepidium meyemii的根茎,原产海拔3500-4500米的南美安第斯山区,药用历史悠久。玛咖富含营养成分,且含有多种次生代谢产物,如玛咖酰胺、玛咖烯、生物碱、芥子油苷、异硫氰酸酯、甾醇和多酚等。玛咖的药理作用有提高生育力、改善性功能、治疗女性更年期综合症等。根据颜色不同又可分为黑、紫、红、黄等多个品种,由于原产地的玛卡供不应求,很多国家都引种了该植物。我国也引种了玛咖,目前主要在云南、西藏、吉林等地种植,但引种玛卡是否与原产地质量是否相同还有待研究。骨质疏松是老龄化社会的普遍问题,主要在绝经后妇女和老年人群中发病,骨质疏松的治疗主要采用激素替代疗法,但长期服用激素可能导致乳腺癌、冠心病、血栓栓塞、阴道出血等不良症状。因此,人们一直在寻找副作用较小的替代疗法。药用植物秘鲁产玛咖在早期的研究中被报道有改善骨代谢作用,但其有效成分和机制还并不明确,引种玛卡的抗骨质疏松作用还有待进一步研究。目的本文以云南鹤庆产黄玛咖为材料,研究玛咖乙酸乙酯部位的化学成分,考察云南黄玛咖抗骨质疏松作用,并对其抗骨质疏松有效部分进行筛选。方法1.玛咖乙酸乙酯部位化学成分研究本文对玛咖的乙酸乙酯部位进行化学成分研究。采用硅胶柱色谱、薄层色谱、制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,通过理化常数和波谱数据鉴定化合物结构。2.玛咖抗骨质疏松有效部位筛选在抗骨质疏松试验中,本文采用维甲酸致骨质疏松小鼠为动物模型,即给三月龄雌性昆明小鼠连续灌胃维甲酸30 d制造骨质疏松动物模型。之后,继续灌胃维甲酸的同时,分别给药云南产黄玛咖的乙醇提取物和其水溶部位、正丁醇部位、乙酸乙酯部位、石油醚部位,连续处理28 d。末次给药后,处死小鼠。测定小鼠脏器指数和血清中碱性磷酸酶、抗酒石酸酸性磷酸酶、血清钙的含量;测定右股骨干重、长度、直径;测定左股骨骨密度、骨小梁数目、厚度和间距;取第二腰椎骨制作骨组织切片,观察骨组织形态学。结果1.玛咖乙酸乙酯部位化学成分研究从玛咖乙酸乙酯部位中分离出了8个化合物,分别为N-苄基十六碳酰胺(1)、β-谷甾醇(2)、N-苄基十八碳酰胺(3)、松脂素(4)、苯乙酰胺(5)、胡萝卜苷(6)、尿嘧啶(7)、松脂素-4′-O-β-D-葡萄糖苷(8),其中化合物8首次从玛咖中获得。2.玛咖抗骨质疏松有效部位筛选研究结果发现玛咖各个提取部位不同程度地改善维甲酸所致骨质疏松,玛咖正丁醇提取物和水溶性部位都能显著改善脾脏和卵巢的脏器系数,其他提取物组对脏器系数没有显著影响;玛咖水溶性部位和乙醇总提取物对模型组的生化指标有显著的改善作用;玛咖水溶性部位对股骨物理指标的效果最为显著,其次为正丁醇提取物和乙醇总提取物,而低极性部分石油醚几乎没有作用;玛咖中极性大的提取部分对维甲酸造成的股骨金属含量损失有较好的作用效果;玛咖水溶性部位能显著的改善骨密度(BMD)、骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁间距(Tb.Sp)等micro-CT指标;小鼠病理组织切片的骨小梁状态显示和骨显微结构结果基本一致,乙醇总提取物,正丁醇和水溶性部分对骨组织形态和显微结构改善作用效果较好,其中水溶性部分效果最好。结论1.从玛咖乙酸乙酯部位中分离出了8个化合物,松脂素-4′-O-β-D-葡萄糖苷首次从玛咖中获得2.云南鹤庆产黄玛咖对骨质疏松有治疗作用,其有效成分为极性大的物质,主要集中在水溶性部位。