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目的研究RET原癌基因(RET proto-oncogene)、胶质细胞源性神经生长因子(Glial-derived neurotrophic factor,GDNF)、SOX10(Sry box10)、钙视网膜蛋白(Calretinin,CR)和β1integrin(ITGB1)在先天性肠无神经节细胞症(Hirschsprung’s disease,HD)患儿不同的肠段各层中的分布及表达情况。探讨其在先天性肠无神经节细胞症的发生发展中的可能作用及对于两者诊断和鉴别诊断的临床意义。方法①随机选择我院病理诊断为HD的手术切除结肠标本42例，10例肠神经元发育不良症（IND-B）和5例神经细胞减少症（HG）肠道标本的痉挛段和正常段。另选取尸检结直肠标本10例（均死于非消化系统性疾病,并获得患儿家属知情同意）作为对照组。采用免疫组织化学法染色检测，观察RET/GDNF、SOX10和CR在不同肠段肠壁中的分布及表达情况。采用彩色病理图像分析软件进行定量分析。②另选取40例我院病理诊断为HD的手术切除新鲜结肠标本的痉挛段、移行段、正常段。采用免疫组织化学法染色、Western blot和RT-PCR检测肠壁中β1integrin蛋白和mRNA的表达情况，并结合图形分析，比较表达的差异。结果①HD痉挛段肠壁神经丛CR、RET、GDNF和SOX10四种神经标志物表达均缺失。IND-B病变肠段神经丛的面积和神经节细胞直径增大、数量增多。HG病变肠管内神经丛面积和节细胞直径均减小，节细胞数量也减少。在HD正常肠段和对照组肠组织，CR主要表达在成熟的神经节细胞和神经纤维上，而在幼稚的神经节细胞不表达或者呈弱阳性表达；RET在幼稚神经节和成熟神经元均表达；GDNF主要表达在神经节细胞和平滑肌细胞；SOX10主要在神经节细胞、神经胶质细胞和神经纤维上表达。②HD病变段肠壁内肌间和粘膜下神经丛内神经元及神经胶质细胞缺失，偶可见增生明显的神经纤维丛，为正常组3-4倍以上。HD正常段肌间神经丛面积为(4952.29+1227.3)um2,HG肌间神经丛面积为(2996.79+1162.14)um2明显小于正常(P<0.01)，IND-B肌间神经丛面积为(7991.3+1188.19)um2明显大于正常(P<0.01)。正常肠管内，每个肌间神经丛内可发现(4.25+1.16)个完整神经节细胞。HG仅为(1.53+0.64)个，有的甚至缺如。IND-B病变段肌间神经丛内节细胞数量为(7.54+2.49)个与正常组相比明显增加（P<0.01）。③免疫组织化学结果示β1integrin免疫沉淀产物主要表达在神经节细胞的细胞浆和胞膜中表达，正常对照组、移行段和痉挛段肠壁中阳性区域平均光密度值（0.86±0.16，0.61±0.15，0.35±0.07）依次递减，差异具有统计学意义（P＜0.05）。β1integrin在HD狭窄段和移行段肠管中mRNA转录水平的表达分别（0.77±0.17，1.08±0.15），均低于正常对照组(2.26±0.29)(P＜0.05)。同时Western blot检测显示β1integrin蛋白在各组中的表达与mRNA水平呈平行结果。结论免疫组化联合检测神经标志物CR和RET蛋白的表达，可以更利于HD和HAD两种疾病的诊断和鉴别诊断。β1integrin在HD痉挛段和移行段的表达减低，β1integrin可能在HD的发病过程中起到重要的作用。