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背景：医用敷料是指作为皮肤暂时的替代物,覆盖于皮肤伤口创面上,保护伤口、避免遭受二次损伤,同时能为伤口创面的愈合营造一个微湿、低氧或无氧、微酸的微环境,从而促进伤口创面的快速愈合。其发展经历了数百年历史,但前期发展缓慢。直到20世纪60年代,英国动物生理学家Winter研究发现,密闭保湿敷料覆盖伤口时其上皮化率比暴露疗法速度快1倍。同时期的学者Hinman和Maibach的研究也证实了此观点。从此,“湿润愈合”理念开始被广泛接受。随着人们对伤口创面愈合过程中的病理生理机制了解得越来越深入,在“湿润愈合”理念指导下的各种新型保湿敷料层出不穷,呈现多样化、功能化的发展趋势。理想的敷料应该具有良好的渗液吸收性、创面保湿性及透气性,而且使用方便舒适、主动促进愈合、价格低廉等特点。目前临床上常见的医用敷料有：传统纱布类敷料,新型保湿密闭性敷料以及中药类敷料。纱布类传统敷料存在着容易致伤口干燥、粘连伤口、隔菌性差、频繁更换等缺点,在未来伤口创面治疗修复中将被逐渐淘汰。新型保湿敷料,具有一定的伤口创面环境的管理能力,能为伤口营造一个适宜的微环境,在临床各类伤口创面的治疗修复中扮演着重要角色。但新型敷料也存在着功能较单一,缺乏主动促进愈合功能,技术含量较高致使价格普遍较昂贵等缺点,也制约着其大面积推广使用。而中药类敷料,在治疗皮肤伤口创面中独具特色,具有主动促进创面愈合、疗效显著、安全可靠等优点,适合于各类急慢性伤口创面的治疗护理。然而中药类敷料也存在着剂型紊乱、落后、使用不便、缺乏系统的工艺研究等问题,致使其仅仅在临床小范围应用,没有得到更进一步普及推广。目前为止,尚未有一种敷料能符合人们对理想创面敷料的要求。基于目前临床上医用敷料的发展现状,本课题对一民间伤科验方进行改革,将该中药伤科验方的特色与新型保湿敷料的优点结合起来,克服其缺点,研制开发出一种具有主动促进创面愈合功能,同时又具备现代保湿性敷料优点的新型中药海绵敷料,并按照中药新药研发流程进行系统研究,为后期产品敷料的产业化放大生产提供实验依据。研究目的：该伤科验方“三七复方”具有抗菌消炎、止血祛瘀、消肿定痛之功效,是治疗皮肤外伤创面的良方。本研究以“三七复方”的功效作为拟研发中药海绵敷料的药理基础,克服该验方原使用中存在的剂型落后、利用率低、易污染伤口等缺点,结合当代新型保湿敷料的优点进行改革创新；采用性能优良的医用高分子材料制备出的海绵作为药物载体,在此基础上加入该伤科验方的提取物,研制开发出一种新型的密闭性的中药海绵敷料。本敷料可用于各类机械性的皮肤损伤、慢性感染创面、下肢溃疡、糖尿病足溃疡等伤口创面。为了研发出的中药海绵敷料能成为医用敷料产品上市推广,本课题按照中药新药研发流程,对中药复方的提取工艺、海绵敷料的成型工艺、海绵敷料的药理学等进行一系列系统研究,从而为产品敷料后期产业化放大生产提供实验依据。研究方法：1.三紫创愈海绵敷料的提取工艺研究本伤科验方由三七、紫珠、白及、儿茶、鸡矢藤、两面针等中药按照中医传统“君臣佐使”原则进行组合而成。本研究在广泛查阅文献、咨询中药制剂学专家以及系统分析该验方各味药材中富含成分的理化性质的基础上,采用正交试验设计法作为本实验的研究方法,以高效液相色谱法作为中药复方提取液含量测定的方法,以复方中起主要治疗作用的君药三七中的主要药理活性成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Rg1作为中药复方提取工艺的评价指标,同时选取能从整体间接评价复方各药材提取率的另一个重要而且常用的浸膏得率指标,三者共同评价筛选提取工艺；分别考察了乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数等影响中药复方提取效果的因素,从而优选出三紫创愈海绵敷料的最佳提取工艺。然后在优选出的最佳工艺条价下,平行制备三批样品,进行工艺验证,以评价所筛选出的最佳提取工艺的效能,为中药复方后期的工业化放大提取提供实验依据。2.三紫创愈海绵敷料的成型工艺研究在课题组前期文献调研和预实验基础上,本研究筛选出的具有抗菌、止血、促愈合等作用的医用高分子材料如聚乙烯醇、壳聚糖、明胶作为海绵敷料基质的处方成分,同时系统考察文献报道的海绵成分组成及配比、交联剂、海绵制备工艺流程等,确定了敷料海绵基质聚乙烯醇、壳聚糖及明胶三者间的配比,交联剂戊二醛的用量和起增塑、保湿作用的甘油用量等三者作为海绵敷料成型的影响因素,以加药量(1.9g/ml)作为固定影响因素,采用正交试验设计法作为海绵敷料成型工艺的筛选方法,小批量制备出一种表面较为柔软、致密,内部呈现三维立体网格结构的中药海绵敷料。在此基础上,再次通过文献调研遴选出医用海绵常用的评价指标,制定出简易的专家咨询表,采用五级评分法进行专家咨询,咨询了包括中药制剂学、药理学、烧伤整形、临床外科、护理学、伤口专科护理师等17位专家,最终筛选出专家认同率最高的吸水率、保湿性、透气率等3个指标共同作为海绵敷料的评价指标,对制备出的海绵敷料进行评价及筛选,从而优选出三紫创愈海绵敷料的最佳成型工艺。最后在优选出的最佳工艺条件下,平行制备三批样品,进行工艺验证,以评价所筛选出的最佳成型工艺的效能,为后期产品的工业化大生产提供实验依据。3.三紫创愈海绵敷料对大鼠创面愈合影响的初步研究本研究采用完全随机设计法作为三紫创愈海绵敷料药理学实验的研究方法,采用大鼠背部小面积全层皮肤缺损作为该敷料疗效评价的伤口模型,大鼠造模后随机分成纱布敷料组、海绵基质组和海绵敷料组,以大鼠创面大体形态学观察、创面愈合率及创面组织学观察等作为疗效评价指标,分别于造模后3天、7天、14天进行指标采集和记录,并对数据进行统计分析,以客观评价三紫创愈海绵敷料的疗效,从而为后期产品敷料的临床试验提供实验依据。研究结果：1.三紫创愈海绵敷料的最佳提取工艺实验结果显示,在乙醇浓度、乙醇用量、提取时间等中药复方提取效果的影响因素中,乙醇浓度对复方浸膏得率的影响具有显著性意义(P<0.05)；提取次数单因素实验结果显示,处方量药材连续提取2次,浸膏得率的提取率之和为93.51%,人参皂苷Rg1、人参皂苷Rbl的提取率之和分别为92.90%、91.58%,三者的提取率均大于90%。综合考量基础上,优选出的中药复方提取工艺为：以处方量药材,加入浓度为70%的乙醇8倍量,提取2次,每次提取2h,提取液滤过,合并两次滤液,即得。在此优选条件下,平行制备3批样品,进行工艺验证,结果显示在优选出的最佳工艺条件下,其浸膏得率均高于9个正交试验提取工艺的结果,其余两个评价指标人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的得率均接近最高水平,表明在该筛选出的最佳提取工艺条件下,中药复方有效成分的提取率最高。2.三紫创愈海绵敷料的最佳成型工艺实验结果显示,在基质配比、戊二醛用量、甘油用量等3个影响海绵成型性的因素中,基质的配比对海绵的吸水率的影响具有显著性意义(P<0.05),戊二醛的用量对海绵的保湿性影响具有显著性意义(P<0.05)。综合考量基础上,优选出最佳成型工艺为：聚乙烯醇：壳聚糖：明胶配比为1：3：1,交联剂戊二醛用量为0.7m1,增塑剂甘油用量为1.0ml。工艺验证结果显示,在优选出的海绵敷料最佳成型条件下,制备的海绵的吸水率均高于9个正交试验成型工艺的结果,海绵的保湿性和透气率也接近最高水平。中药海绵敷料的制备流程：(1)中药复方浓缩液制备：取处方量的药材,加入70%乙醇8倍用量,回流提取2次,每次2h。提取液滤过,合并两次滤液,浓缩至50m1,浓度为1.9g/ml,即得。(2)海绵制备工艺：基质溶液按比例混合30m1→充分搅拌→加入甘油1ml→充分搅拌→加入2m1药液(含3.8g生药)→充分搅拌→加入戊二醛0.7m1→充分搅拌→铺膜→-20℃冷冻24小时→80℃真空冷冻干燥→成品密封包装,即得。3.三紫创愈海绵敷料对大鼠创面愈合影响的初步研究实验结果显示,海绵基质组和海绵敷料组大鼠创面愈合情况在造模后7天、14天显著优于纱布敷料组,而海绵基质组与海绵敷料组大鼠创面愈合情况两组间比较没有显著性差异。表明：本课题制备的高分子海绵基质具有促进伤口创面愈合的效果,而海绵基质中承载的伤科验方提取物尚未发挥预期疗效。结论：1.中药复方提取工艺优选实验研究结果表明,建立的含量测定方法准确、可靠、重复性好,优选出的最佳提取工艺稳定、合理、可行,具有省时、省力、高效等优点,为后期产业化放大提取提供了实验依据。2.海绵敷料成型工艺实验研究结果表明,优选出的海绵敷料的最佳成型工艺稳定、合理、可行,制备出的中药海绵敷料具有良好的吸水率、保湿性和透气率,为后期产品敷料产业化放大生产提供了实验依据。3.海绵敷料的初步药理学研究未取得理想结果,经过与制剂专家的充分讨论和分析,总结出本实验存在的可能影响因素在于：(1)动物模型的选择存在缺陷；(2)研究设计上的不足；(3)海绵敷料的载药量及药物缓释性问题,这为后期拟开展的进一步研究工作提供了思路和方向。