【摘 要】
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共轭聚合物具有优良的荧光性质，可以用于高灵敏的荧光检测 分析。此外，共轭聚合物还能敏化周围的氧气产生活性氧物种，造成生物大分子的氧化损伤。通过阳离子共轭聚合物与DNA
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共轭聚合物具有优良的荧光性质，可以用于高灵敏的荧光检测 分析。此外，共轭聚合物还能敏化周围的氧气产生活性氧物种，造成生物大分子的氧化损伤。通过阳离子共轭聚合物与DNA结合形成共聚物/DNA复合物，进行了DNA甲基化检测及蛋白质失活研究。主要研究内容如下: 1.建立了一种基于共轭聚合物荧光共振能量转移(FRET)技术的甲基化检测方法，并用于卵巢癌诊断。基因组DNA首先进行甲基化敏感限制性内切酶消化，然后通过PCR扩增引入荧光素标记的dNTP。共轭聚合物与引入到PCR产物中的荧光素发生有效的FRET，检测得到样本的甲基化水平值。本论文针对卵巢癌的三个相关基因的启动子区进行了甲基化检测。经过联合分析，我们设定了癌症诊断的阈值，灵敏度为85.7％。相比以前的方法，这一方法的优势在于:用阈值设定法代替了统计和累积分析，更加适用于即时检测;多个基因的DNA甲基化联合分析，相比单个基因，提供了更加特异性的癌症诊断方法。 2.建立了一种共聚物/DNA复合物介导的蛋白质光致失活方法，进一步拓展了共轭聚合物在发色团辅助的蛋白质光致失活技术中的应用。目标蛋白质首先与单链DNA共价连接，形成蛋白质-DNA共价连接复合物。通过静电和疏水相互作用，单链DNA与阳离子共轭聚合物形成共聚物/DNA复合物，从而拉近目标蛋白质与共轭聚合物之间的距离。光照条件下共轭聚合物产生活性氧物种，使邻近的目标蛋白质失活。该方法可高效失活目标蛋白质，并且具有很好的特异性，为蛋白质功能以及蛋白质活性调控研究提供了新技术。
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