论文部分内容阅读
目的：探讨PKCε在偏头痛中枢敏感化机制中的作用及加巴喷丁的干预研究。方法：选用健康成年雄性SD大鼠，体重200-250g，144只，将实验大鼠随机分为正常组（N group）、假手术组（C group）、偏头痛模型组（M group）、氟桂利嗪组（F group）、加巴喷丁组（G group）和H-7组。每组大鼠24只，共144只。分别用电生理、Western-blot和液相色谱-质谱法等技术或方法，从硬脑膜血流量、三叉神经脊束核细胞外放电频率、PKCε膜转位水平和脑脊液氨基酸含量等方面进行实验。所有实验数据均以均数±标准差（x±S）表示。统计学检验采用SPSS10.0软件包单因素方差分析（One WayANOVA）处理，显著性水平P<0.05。结果：本实验成果复制Moskowitz偏头痛大鼠实验模型，模型复制成功后，动物出现刺激侧咀嚼肌收缩、口鼻分泌物增加以及前肢频繁搔头、紧闭眼睛、爬笼次数增多、烦躁不安等行为学改变。（1）硬脑膜血流量检测：造模后2h模型组与正常对照组相比，硬脑膜血流量明显增加，统计学有显著性差异，P<0.01；氟桂利嗪组、加巴喷丁组和H-7组分别与模型组相比，硬脑膜血流量明显减少，P<0.01；加巴喷丁组和H-7组分别与氟桂利嗪组相比，明显减少，P<0.01；H-7组与加巴喷丁组相比，明显减少，P<0.01；氟桂利嗪组与正常对照组相比，血流量明显增加，P<0.01；加巴喷丁组和正常对照组相比，血流量无明显差异，P>0.05；H-7组与正常对照组相比，血流量明显减少，P<0.01。（2）三叉神经脊束核细胞外放电频率监测：偏头痛大鼠造模后，三叉神经脊束核细胞外放电频率增加，到造模后2h为造模前的325.88±47.32%；氟桂利嗪组、加巴喷丁组和H-7组与模型组相比，放电频率明显下降，P<0.01；氟桂利嗪组和加巴喷丁组与正常对照组相比，放电频率增加，P<0.01；H-7组与正常对照组相比，无明显变化，P>0.05；加巴喷丁组和H-7组与氟桂利嗪组相比，放电频率明显下降，P<0.01；H-7组和加巴喷丁组相比，无明显差异P>0.05。（3）PKCε膜转位水平测定：模型组、氟桂利嗪组和加巴喷丁组与正常对照组相比，PKCε膜转位水平明显增加，P<0.01；H-7组与正常对照组相比，明显降低，P<0.01；氟桂利嗪组、加巴喷丁组和H-7组和模型组相比，水平明显降低，P<0.01；加巴喷丁组和氟桂利嗪组相比，无显著性差异，P>0.05；H-7组和氟桂利嗪组相比，膜转位水平降低，有显著性差异，P<0.01；H-7组和加巴喷丁组相比，明显降低，P<0.01。（4）脑脊液氨基酸含量测定：模型组、氟桂利嗪组、加巴喷丁组与正常组相比，兴奋性氨基酸（谷氨酸、天门冬氨酸）含量增加，P<0.01；H-7组与正常对照组相比，无显著性差异，P>0.05；氟桂利嗪组、加巴喷丁组和H-7组与模型组相比，兴奋性氨基酸水平明显减少，P<0.01；加巴喷丁组和H-7组与氟桂利嗪组相比，明显减少，P<0.01或P<0.05；H-7组与加巴喷丁组相比，同样明显减少，P<0.01。模型组、氟桂利嗪组、加巴喷丁组和H-7组与正常组相比，抑制性氨基酸（γ-氨基丁酸和丝氨酸）水平明显减少，P<0.01；模型组、氟桂利嗪组、加巴喷丁组和H-7组之间相比无显著性差异，P>0.05。结论：（1）PKCε参与偏头痛中枢敏感化形成机制，可以作为治疗偏头痛中枢敏感化药物靶点；（2）氟桂利嗪、加巴喷丁和H-7均对偏头痛中枢敏感化有治疗作用，加巴喷丁的药物效果优于氟桂利嗪，而H-7的疗效优于加巴喷丁。创新点:1、初步探讨偏头痛中枢敏感化机制。证明PKCε在偏头痛中枢敏感化机制形成中起重要作用。2、从偏头痛中枢敏感化机制入手，研究治疗偏头痛新的药物靶点。证明偏头痛中枢敏感化形成抑制剂，如氟桂利嗪、加巴喷丁和H-7均对偏头痛中枢敏感化有治疗作用。3、初步研究偏头痛中枢敏感化不同治疗药物药物疗效。证明加巴喷丁的药物效果优于氟桂利嗪，而H-7的疗效优于加巴喷丁。