【摘 要】
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对比剂肾病（CIN）是应用造影剂后48-72小时内出现的医源性肾损伤,导致血肌酐较基线显著升高。CIN是医院获得性急性肾功能不全的常见原因,带来患者死亡率上升、治疗费用增加和住院时间延长等问题。一旦发生CIN,目前临床没有特效治疗方法,因此探讨CIN发病机制并对其进行有效防治已成为当前研究热点。目前水化仍是临床预防CIN主要措施,然而当前并无最优水化方案及共识。本文旨在比较术前水化与术后水化对冠心
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对比剂肾病（CIN）是应用造影剂后48-72小时内出现的医源性肾损伤,导致血肌酐较基线显著升高。CIN是医院获得性急性肾功能不全的常见原因,带来患者死亡率上升、治疗费用增加和住院时间延长等问题。一旦发生CIN,目前临床没有特效治疗方法,因此探讨CIN发病机制并对其进行有效防治已成为当前研究热点。目前水化仍是临床预防CIN主要措施,然而当前并无最优水化方案及共识。本文旨在比较术前水化与术后水化对冠心病患者择期经皮冠脉介入治疗术（PCI）后CIN预防作用有无差别;进一步深入探讨中药提取物旋覆花内酯（ABL）缓解对比剂诱发急性肾损伤（CI-AKI）的作用和机制。第一部分不同水化方式对冠心病患者择期经皮冠脉介入治疗术后对比剂肾病预防作用研究目的:旨在比较术前水化与术后水化对冠心病患者择期经皮冠脉介入治疗（PCI）术后对比剂肾病（CIN）预防作用有无差别。方法:回顾性研究采用倾向得分匹配纳入198例术后水化和396例术前水化病例,比较两组PCI术后48小时CIN发生率及造影剂暴露后30天内不良事件发生率。采用Logistic回归分析CIN发生相关危险因素。结果:两组患者基线临床特征相似。术后水化组CIN发生率为3.54%,术前水化组为4.8%,两组比较差异无统计学意义（P=0.478）。多因素Logistic回归分析表明,糖尿病、基线BNP及胱抑素C水平、造影剂用量为CIN发生独立危险因素。30天临床随访结果发现,术后水化组与术前水化组主要不良事件发生率无明显差异（3.03%vs.2.02%,P=0.830）。结论:术后水化与术前水化对冠心病择期PCI患者发生CIN预防作用相当。第二部分Caspase-1介导的细胞焦亡在对比剂致急性肾损伤中的作用及机制研究目的:旨在探讨Caspase-1介导的细胞焦亡在对比剂致急性肾损伤（CI-AKI）中的作用及机制。方法:应用碘普罗胺（IOP）刺激人肾小管上皮细胞（HK-2）,造成细胞焦亡模型。分别采用CCK-8法检测细胞存活率;LDH释放法评估细胞死亡;ELISA法检测细胞焦亡炎性标志物IL-1β与IL-18;Western blot检测焦亡相关蛋白;FLICA/PI双染流式细胞术检测HK-2细胞焦亡。结果:随诊IOP浓度增加（0 20 40 80 160 mg I/m L）、刺激时间延长（0 10 30 60 120 min）,细胞存活率逐渐下降;LDH释放活性不断升高;细胞焦亡炎性标志物IL-1β与IL-18分泌逐渐增多;焦亡相关蛋白NLRP3、ACS、Mature-GSDMD、Cleaved-caspase-1、IL-1β水平逐渐升高;FLICA/PI双重染色细胞焦亡数量逐渐增多。结论:对比剂可诱导肾小管上皮细胞发生焦亡;Caspase-1介导的细胞焦亡通路在CI-AKI中发挥重要作用。第三部分旋覆花内酯通过抑制细胞焦亡减轻对比剂诱发的急性肾损伤目的:明确旋覆花内酯（ABL）对造影剂诱发急性肾损伤（CI-AKI）的保护作用,并揭示其潜在机制。方法:建立碘普罗胺（IOP）诱导急性肾损伤小鼠模型,应用ABL进行干预;IOP诱导体外培养HK-2细胞焦亡,应用ABL进行干预。HE染色观察小鼠肾脏组织病理变化。LDH释放法评估肾小管上皮细胞死亡。Western blot分析检测焦亡相关NLRP3、ACS、Mature-GSDMD、Cleaved-caspase-1、IL-1β蛋白水平。ELISA法检测小鼠血清尿素氮（Urea）、肌酐（s Cr）及焦亡相关因子。用FLICA/PI染色流式细胞术检测肾小管上皮细胞焦亡。结果:与IOP诱导的急性肾损伤小鼠模型比较,ABL干预后小鼠血清尿素氮（Urea）、肌酐（s Cr）及IL-1β、IL-18水平明显下降,肾小管损伤评分明显改善。同时,焦亡相关蛋白NLRP3、ACS、Mature-GSDMD、Cleaved-caspase-1、IL-1β水平明显降低。在体外试验中,ABL干预能减少IOP诱导的肾小管上皮细胞LDH释放,同时降低焦亡相关蛋白表达水平,此外流式细胞术结果显示ABL能缓解IOP诱导HK-2细胞焦亡。结论:旋覆花内酯可通过抑制Caspase-1介导的细胞焦亡减轻对比剂诱发的急性肾损伤。
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