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背景鼻咽癌是我国南方常见的恶性肿瘤,因为其解剖位置的特殊及容易累及颅底,发生咽旁及颈部淋巴结转移,其主要的治疗手段为放射治疗,虽然放疗技术不断提高,但患者五年生存率无明显改善,探索新的治疗方式成为当前研究的热点。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Mammalian Target of Rapamycin,mTOR)是PTEN/PI3K/AKT/mTOR信号通路中的一个关键分子,在调控细胞生长增殖中起着关键的作用。众多研究表明mTOR信号通路在肿瘤细胞中异常激活,因此成为抗肿瘤治疗中一个有效的靶点。近年来mTOR抑制剂用于多种肿瘤的治疗显示出潜在的优势,其临床前期实验和临床试验已在积极地进行中。但mTOR抑制剂在鼻咽癌治疗方面罕有报道。目的本课题旨在观察一种mTOR特异性抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)对人鼻咽癌细胞株生长、细胞周期的影响,探讨mTOR信号通路下游因子核糖体40S小亚基S6蛋白激酶(p70S6K)和真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)在Rapamycin抗肿瘤活性中的作用。方法不同浓度(0、5、10、20、40、80、160nmol/L)Rapamycin处理鼻咽癌细胞株CNE-1、CNE-2,应用CCK-8法测定不同时间点(24h、48h、72h)细胞生长抑制率;光学显微镜直接观察药物处理48h后细胞形态学变化;流式细胞仪进行细胞周期、凋亡率的分析;RT-PCR检测药物处理前后mTOR、p70S6K和p4EBP1的mRNA水平的差异。结果(1)Rapamycin处理48h、72h的CNE-1、CNE-2细胞株,随着药物浓度的增加,细胞生长抑制率增高,变化呈浓度依赖性,与对照组生长抑制率相比,差异有统计学意义(P＜0.05),24h抑制率与对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05)。药物处理后48hCNE-1细胞密度明显降低,细胞形态变小,伪足减少变短。CNE-2细胞密度明显降低,细胞形态变化不明显。(2)CNE-1、CNE-2细胞在Rapamycin作用下,G1期的细胞增加,S期的细胞减少,G1期细胞比例与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05),且变化呈浓度依赖性,但诱导细胞凋亡的作用不明显。(3)Rapamycin抑制了CNE-2细胞株mTORmRNA的表达,并使p70S6K和p4EBP1的mRNA表达降低,差异有统计学意义,且变化亦呈现浓度依赖性。结论(1)Rapamycin能抑制鼻咽癌细胞株CNE-1、CNE-2生长及增殖。(2)流式细胞检测结果提示Rapamycin抑制CNE-1、CNE-2生长及增殖的机制可能主要是抑制了细胞周期进展,将细胞阻滞于G1期,而非诱导细胞凋亡。(3)Rapamycin能抑制鼻咽癌细胞株CNE-2中mTOR mRNA的表达及其下游底物p70S6K和4EBP1的磷酸化,进而抑制翻译起始,降低蛋白质的合成,从而抑制CNE-2细胞的生长。(4)上述结论为Rapamycin靶向治疗鼻咽癌打下良好的实验基础。