红景天活性成分的提取分离及其心血管保护机制研究

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红景天取自红景天属植物(Rhodiola)的根茎部分,是一种使用历史悠久的中药材,可用于促进血液循环,缓解哮喘和治疗心绞痛和中风。红景天苷和酪醇是红景天药材的主要生理活性成分。   本文通过抗氧化、缺血/再灌注致心肌凋亡的保护作用和降低胆固醇这三方面对红景天中的主要生理活性成分—红景天苷和酪醇的心血管保护作用机制进行了探究,主要发现如下:   1.通过三步法,即超声波提取→ HP-20合成吸附树脂富集→硅胶色谱柱层析分离,酪醇与红景天苷的纯度分别达到99.04%和94.58%。   2.运用总酚含量和氧自由基吸收能力试验比较了红景天苷和酪醇与红景天提取物的抗氧化能力,红景天苷与酪醇的抗氧化能力明显优于红景天提取物。   3.在活性氧家族(ROS)清除试验中,红景天苷和酪醇能够显著降低心肌因缺血/再灌注所致的活性氧大量产生。红景天苷与酪醇混合使用对于清除ROS的效果优于两个化合物单独使用,表明红景天苷与酪醇可能具有正向协同作用。   4.在脂多糖(LPS)处理白血球THP-1细胞所致的超氧阴离子产生试验中,酪醇对LPS处理的THP-1细胞超氧阴离子产生呈现出降低作用,表明酪醇能够降低白血球THP-1细胞的超氧阴离子产生。   5.使用心肌缺血/再灌注模型探讨了红景天主要活性成分红景天苷和酪醇对H9c2心肌细胞缺血/再灌注所致凋亡的保护作用,试验表明缺血/再灌注通过c-Jun氨基末端激酶(JNK)活化途径和活性氧家族的产生导致心肌凋亡的发生,而红景天苷与酪醇能够减轻缺血/再灌注所引起的凋亡发生。红景天苷和酪醇对于心肌的保护机制应为1)抑制c-Jun氨基末端激酶的活化;2)降低活性氧家族在缺血/再灌注过程中的大量产生和积聚。他们共同保护了线粒体功能,阻止细胞色素c的释放和随之发生的半胱氨酸蛋白酶-3的活化。红景天苷和酪醇具有对抗缺血/再灌注所致凋亡的心肌保护作用。   6.动脉粥样硬化的形成与多种因素有关,其中胆固醇的升高是促成动脉粥样硬化形成的一个重要因素。通过细胞饥饿模型发现酪醇可降低肝源性HepG2细胞的总胆固醇含量,同时发现酪醇的这种胆固醇降低作用是通过抑制胆固醇合成关键性酶-HMG-CoA还原酶活力而产生的,说明酪醇对胆固醇的降低作用与降脂药物他汀类相似。肝毒性试验表明酪醇在较大使用剂量下仍未显示出HepG2肝细胞毒性。本研究为酪醇开发成为一种新型的降脂药物提供一定地试验依据。
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