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本论文开展了酪蛋白源抗菌肽的生物学研究。确立了酪蛋白酶解产生抑菌肽的条件。酶解产物通过SDS-PAGE电泳分析,SephadexG-15凝胶层析分级分离。研究了该抗菌肽制剂的抗菌谱及其理化性质,并探讨其对实验性大鼠乳腺炎的保护作用。 一、酪蛋白胰蛋白酶水解肽的制备 等电沉淀法制备酪蛋白。以37℃,牛胰蛋白酶:酪蛋白=1:30（W/W）,初始pH8.0,分别酶解5min,15min,30min,45min,1h,2h,3h,4h,5h,其中酶解时间超过15min者,在酶解进行至15min时,再调pH8.0。酶解液经SDS-PAGE,考马斯亮兰染色,结果显示:至2小时酶解基本完成。半微量凯氏定氮法测定各酶解液含氮量,茚三酮法测定各酶解液水解度。结果显示:2小时酶解液氮含量为4.608±0.005mg/mL（n=3）,水解度为10.5%,平均肽链长度为9.52。 二、酪蛋白酶解产物体外抑菌活性研究 1 不同时间酶解液抑菌活性的初步测定 用微量稀释法测定了不同时间酶解液对金黄色葡萄球菌（ATCC25923）和大肠杆菌（ATCC25922）的抑菌活性。结果显示:2h、3h酶解液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有一定的抑菌作用。酪蛋白和胰蛋白酶本身及其他时间酶解液无抑菌活性。说明酪蛋白经酶解可以产生抗菌肽,对G+、G-菌均有一定的抑菌作用。 2 2小时酶解液对不同菌株最小抑菌浓度（MIC）的测定 用微量稀释法测定了2h酶解液对金黄色葡萄球菌（ATCC25923）、金黄色葡萄球菌（CMCC26801）、大肠杆菌（ATCC25922）、大肠杆菌(O138)、大肠杆菌（CMCC46103）、链球菌、枯草杆菌、鸡巴氏杆菌、兔沙门氏菌的MIC分别为0.045mg/mL、0.045mg/mL、0.09mg/mL、0.09mg/mL、0.09mg/mL、0.36mg/mL、0.18mg/mL、0.36mg/mL、0.36mg/mL。表明2h酶解液含有抗菌肽,对G+、G-菌的抑