基于反应型的高灵敏硫化氢荧光探针的构建

来源 :华东理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lxy272012
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受选择性和灵敏性限制,目前用来监测内源性H2S的荧光探针并不常见。因此构建具有H2S快速响应位点的新型荧光探针非常有意义。本文构建了两种新型共轭荧光染料BODInD-1和BODInD-2,能够特异性识别H2S。虽然这类探针与H2S反应导致荧光淬灭,不能灵敏地检测内源性H2S,但反应后吸收光谱红移200nm。该特征可用于构建基于FRET的探针,从而准确地追踪内源性H2S。本文采用自组装和共沉淀的方法,得到3个nanoprobe,对H2S呈现快速、特异性的响应。  1)利用两亲性聚合物mDSPE-PEG将给体BODInD-1与受体BODIPY1引入到胶束的疏水性内腔,获得了一个纳米探针NanoB OD-1。具有以下几个特性:A)水溶性与生物相容性。B)对H2S呈现基于比值法的响应。C)胶束的引入大大加快了探针与H2S的反应,从而保证了其可用于检测生物体中的瞬态H2S。正是由于这些特性,NanoBOD-1可用于raw264.7活细胞中内源性H2S的成像检测,实验结果表明氟伐他汀可刺激raw264.7细胞上调酶CSE的活性,从而产生内源性的H2S。  2)采用BODInD-2作为能量受体,构建了2个基于FRET的纳米探针:A)利用萘酰亚胺共价作用修饰的两性聚合物的自组装特性,与BODInD-2通过共沉淀的方法获得了NanoBOD-2;B)利用两亲性化合物CO520,将BODInD-2与受体共轭聚合物通过共沉淀的方法获得NanoBOD-3。两个纳米探针均对H2S呈现灵敏响应,为后续生物实验的开展创造了良好条件。
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