荧光光杆菌一新亚种的鉴定与描述

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光杆菌属(Photorhabdus)细菌属于r-变形菌纲(Proteobacteria)的肠杆菌科(Enterobacteraceae),是昆虫病原线虫的共生细菌。近年来的研究表明,这类细菌能产生多种有生物活性的次级代谢产物,包括杀虫毒素、抗生素、抗癌药物等,是一类具有极大开发潜力和应用前景的新型生物资源。 本研究通过16S rDNA序列分析结合传统的形态与生理生化鉴定方法对本室最近采集到的5号异小杆线虫的共生菌进行初步的分类鉴定和描述,结果如下: 1.以API细菌鉴定试剂条为主的表型及生理生化特性研究结果显示:五个菌株为革兰氏阴性菌,杆状,有荧光;营养肉汤中最高生长温度为37℃到39℃;在NBTA平板上可吸收染料溴百里酚蓝形成绿色菌落,在麦康凯培养基上能吸收中性红形成红色菌落;硝酸盐还原阴性,过氧化氢酶阳性,能利用果糖、N-乙酰葡糖胺、葡萄糖、甘油、麦芽糖、甘露糖、核糖和海藻糖产酸;部分菌株能利用甘露醇产酸;吲哚产生阳性;与Hetererhabditis sp.共生等,这些特征与荧光光杆菌(P.luminescens)的表型特征基本一致。但是,这些菌株有些特征与P.luminescens已定名的五个亚种有明显的区别,例如,能够利用海藻糖、柳醇、木糖醇作为唯一碳源, O-硝基苯-β-D 吡喃半乳糖甙酶(o-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside,ONPG)呈阳性,不能利用海藻糖产酸等。 2.PCR扩增并测定三个菌株的16S rDNA的全序列,用DNAStar软件包中的。MegAlign程序将其与GenBank中登录的光杆菌属细菌的同源序列进行比对,用N-J法构建系统发育树,结果显示这些菌株形成一个独立的分枝,与P.luminescens kayaii亲缘关系最近但能与之明显区分开来。 综合菌株的形态、生理生化特征和16S rDNA序列分析的结果表明,所鉴定的五个菌株应该是荧光光杆菌的一个新亚种。本研究为进一步开发和利用这些细菌及其与之共生的线虫奠定了基础,也为昆虫病原线虫共生菌的分类鉴定和系统学研究提供了数据。
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