利用屠宰场孕马子宫提取纯化PMSG及其血浆PMSG提纯工艺的研究

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孕马血清促性腺激素(Pregnant Mare’s Serum Gonadotropin,PMSG),也叫马绒毛膜促性腺激素(Equine Chorionic Gonadotropin, eCG),是从怀孕40天~120天的母马血清中提取出来的一种促性腺激素,它是由子宫内膜孔洞分泌产生,为糖蛋白质,分子量约53000。它主要具有类似于促卵泡素(follicle-stimulating hormone,FSH)和促黄体素(luteinizingh ormone,LH)的双重作用,可促进众多卵泡的生成、成熟和排卵。目前PMSG的工业化生产的原料主要来自于妊娠40天~120天的健康母马血浆。为探索开发PMSG工业化生产原料的新途径,本试验以妊娠40天~120天的健康母马子宫为材料,对提取PMSG提取工艺进行了研究,并就孕马子宫粘膜中提取PMSG和由孕马血浆中提取PMSG的效价水平进行对比。试验一旨在探索妊娠40天~120天的健康母马子宫黏膜及分泌物中所含PMSG的含量、效价以及提取PMSG的工艺。本实验采用妊娠66天健康母马子宫一个,刮取杯状细胞所在区域的黏膜组织,利用蛋白质提取方法,结合现有工艺提取PMSG。在提取过程中,探讨了酸度、温度和偏磷酸对PMSG提取工艺的影响等问题。结果表明,怀孕60天的孕马子宫黏膜其中所含PMSG的效价为2800IU/ml(透析液),工艺中所涉及的温度、酸度等条件都极大地影响PMSG的提取效果。试验二以妊娠40天~120天的健康母马血清为材料,测定其中PMSG的效价。为确定所选马匹真实的妊娠日龄,首先核对配种纪录进行核对,随后对其血样进行生物学测定(大鼠注射)确定效价水平。实验结果显示:1)个体孕马血清中所含PMSG的效价水平存在个体差异(50~100IU/ml血清);2)个体孕马血清中PMSG的效价水平随妊娠日龄增长而存在消长规律,母马妊娠45天开始可以从其血浆中测出含有PMSG, 60天~90天时其浓度在血中达到峰值,90天之后PMSG水平开始滑落,直至消失;试验三对孕马混合血浆工艺提取后所得透析液进行效价测定,其效价范围为1700IU/ml~2800IU/ml,本实验仅从一匹孕马(妊娠66天)的子宫中提取得到的PMSG效价即为2800IU/ml,由此可见该试验既拓宽了PMSG提取原料的选择范围,另一方面若将其工业化生产也将产生可观的经济效益。
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