【摘 要】
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川芎嗪(Ligustrazine),即2,3,5,6-四甲基吡嗪(tetramethypyrazine, TMP),属吡嗪类生物碱,具有多种药理作用,并在临床上广泛应用；红曲是一种具有高附加值的产品。本论文主要研
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川芎嗪(Ligustrazine),即2,3,5,6-四甲基吡嗪(tetramethypyrazine, TMP),属吡嗪类生物碱,具有多种药理作用,并在临床上广泛应用；红曲是一种具有高附加值的产品。本论文主要研究红曲霉发酵产物中川芎嗪的检测,产川芎嗪的红曲霉菌株的分离筛选,红曲霉产川芎嗪的液体发酵和固体的工艺,提供一种川芎嗪的生物合成方法,进一步开发红曲作为传统食品的价值,为我国传统食品产业化提供参考。首先,建立红曲霉发酵产物中川芎嗪的定量检测方法。色谱柱为Waters Symmetry C18反向柱(39*150mm,5μm)；检测条件如下：检测波长为290nm,进样体积为l0ul,柱温为35℃,流动相为1%乙酸溶液-甲醇(体积比为80：20),流速0.8 mL/min.从实验室保藏M1-M8和筛选所得的M9-M27总共28株菌中筛选,确定M5为后续实验中的发酵菌株,其川芎嗪产量为11.756μg/ml.通过单因素实验和响应面试验设计,确定培养基的配方为：4.4%可溶性淀粉、2.5%蛋白胨、0.1% MgSO4.7H2O.0.2%NaNO3、0.25%KH2PO4;培养条件为：7.5%的接种量,28.3℃、180rpm,培养周期9天时,模型预测的最大川芎嗪产量为13.712±1.14μg/ml.通过单因素实验和响应面试验设计确定固体发酵培养基5%可溶性淀粉、3%蛋白胨、0.2%NaNO3、0.1%MgSO4和0.25%KH2PO4的大米培养基,在装瓶量为31.25g/250m,接种量8.8%(约2.5ml),培养温度28℃,培养周期11天时,模型预测的最大川芎嗪产量为42.861±1.96μg/g,为液体发酵的3倍。
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