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目的：构建含有套细胞淋巴瘤特异性融合基因CCND1/IgH的嵌合抗原受体慢病毒表达载体pHBLV-CCND1/IgH-CAR，为制备pHBLV-CCND1/IgH-CAR-T细胞提供实验条件，为MCL探索新的免疫治疗方法奠定实验基础。 方法：TRIZOL法从jeko-1细胞中提取总RNA，经RT-PCR法获得CCND1/IgH基因，将其测序结果与NCBI Genbank中的CCND1/IgH基因序列进行比对，确定其内含有 CCND1/IgH 基因；根据 CCND1 和 IgH 基因 CDS 区序列，全基因法合成CCND1/IgH 融合基因；利用重叠延伸 PCR 法将 CCND1/IgH 融合基因和Hinge-TM-CD28-CD3 ζ 片 段 直 接 相 连 ， 得 到 CCND1/IgH-CAR 片 段 ； 将CCND1/IgH-CAR片段克隆至慢病毒载体pHBLV-CMV-MCS-EF1-ZsGreen的EcoRI和BamHI酶切位点，得到pHBLV-CCND1/IgH-CAR质粒；该质粒经双酶切及测序鉴定后与psPAX2质粒和pMD2.G质粒共转染293T细胞，包装成慢病毒，用包装好的慢病毒感染293T细胞，测定病毒滴度。 结果：CCND1/IgH融合基因与Hinge-TM-CD28-CD3ζ片段经重叠延伸PCR法拼接后得到嵌合抗原受体CCND1/IgH-CAR；目的片段CCND1/IgH-CAR和慢病毒载体通过双酶切后连接，得到pHBLV-CCND1/IgH-CAR质粒；pHBLV-CCND1/IgH-CAR质粒经菌落 PCR、DNA 测序验证后构建正确；三质粒共转染法成功包装慢病毒pHBLV-CCND1/IgH-CAR，病毒滴度为2×108TU/ml。 结论：成功构建嵌合抗原受体pHBLV-CCND1/IgH-CAR 慢病毒表达载体，为制备pHBLV-CCND1/IgH-CAR-T细胞提供了实验条件，为恶性淋巴瘤的过继免疫治疗以及提高CAR-T疗法的精准性提供了有价值的参考资料。