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目的:建立肝脏LC-MS代谢组学方法,研究雄黄所致小鼠肝脏中小分子代谢物谱的变化及甘草次酸的保护作用,并通过Nrf2信号通路及抗氧化指标的测定探讨其可能作用机制,为研究雄黄所致肝脏氧化损伤、甘草次酸的肝脏保护作用及甘草与雄黄配伍解毒的机制提供理论依据和研究思路。研究方法:本课题选用由中国医科大学提供的健康ICR雄性小鼠为研究对象,随机将90只小鼠分为对照组、0.15 g/kg雄黄组、0.45 g/kg雄黄组、1.35 g/kg雄黄组、甘草次酸对照组、低剂量甘草次酸干预组（16 mg/kg甘草次酸+1.35 g/kg雄黄）、高剂量甘草次酸干预组（48 mg/kg甘草次酸+1.35 g/kg雄黄）,每日灌胃1次,连续8周,灌胃结束后,处死小鼠,冰浴取小鼠肝脏,存储于-70℃冰箱内备用。采用LC-MS技术检测雄黄暴露及其与甘草次酸联合用药后小鼠肝组织中小分子代谢物谱的变化,采集的代谢物谱图用Markerlynx软件进行处理,所得数据经SIMCA-P11.5进行PLS-DA,根据载荷图和变量重要性值筛选出差异代谢物,采用SPSS 17.0软件对筛选出来的差异代谢物进行单因素方差分析来比较各组组间差异,从而找出具有统计学意义的物质,再结合文献和在线数据库等方法鉴定差异代谢物。采用ELISA法对小鼠肝脏中GSH、GSH-Px、SOD、CAT含量进行测定,观察抗氧化指标的变化情况。采用Western blot法测定小鼠肝脏中Nrf2、NQO1、HO-1和Keap1的蛋白表达水平。结果:1.通过LC-MS技术确定雄黄暴露组及甘草次酸干预组小鼠肝脏中小分子代谢物的变化,结果表明,与对照组相比,雄黄染毒组小鼠肝脏中酪氨酸、烟酰胺、LPC18:2和保留时间质荷比为1.09116.0、1.58119.0的代谢物相对强度显著增加,保留时间质荷比为1.16133.0的代谢物在雄黄染毒组中的相对强度显著降低,高剂量雄黄暴露组中胆碱的相对强度与对照组相比显著降低。与雄黄染毒组比较,甘草次酸干预组小鼠肝组织中烟酰胺、酪氨酸和保留时间质荷比为1.09116.0和1.58119.0的代谢物相对强度明显降低,胆碱和LPC18:2的相对强度显著升高,保留时间质荷比为1.16133.0的代谢物相对强度无明显变化。2.雄黄可引起小鼠肝脏中GSH、GSH-Px、SOD水平显著降低（P<0.05）,但CAT水平变化不明显（P>0.05）,提示雄黄可引起肝脏发生氧化损伤;甘草次酸高剂量组能明显拮抗雄黄引起的小鼠肝脏内GSH、GSH-Px、SOD水平降低（P<0.05）,提示甘草次酸对雄黄所引起的肝损伤具有一定的保护作用。3.雄黄暴露组小鼠肝脏中Nrf2、NQO1和HO-1的蛋白表达水平随着雄黄剂量的增加呈显著升高的趋势,而Keap1蛋白的表达水平无显著的统计学差异;甘草次酸干预组小鼠肝脏中Nrf2、NQO1和HO-1的蛋白表达水平也呈现升高的趋势,其中高剂量甘草次酸干预组变化最为明显,而对Keap1蛋白的表达水平影响不明显。结论:建立的肝脏LC-MS代谢组学方法可检测雄黄所致小鼠肝脏代谢物谱的变化及甘草次酸的干预作用,其具体机制与Nrf2信号通路的活化有关。