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目的:本课题旨在观察联合应用磁性纳米四氧化三铁颗粒[MNP（Fe3O4）]和5-溴汉防己甲素（5-BrTet）对柔红霉素（DNR）诱导的K562/A02细胞凋亡效应的影响，并测定Bcl-2，Bax，p53，Fas和Caspase-3的转录与表达情况，以探讨药物逆转多药耐药（MDR）的可能机制，为临床白血病的治疗提供一定的理论依据。
方法:
（1）应用流式细胞术（FCM）分别检测各种药物作用前后K562/A02细胞和K562细胞的凋亡率。
（2）采用普通光学显微镜和DNA琼脂糖凝胶电泳观察药物作用前后K562/A02细胞形态和生化特征。
（3）采用实时定量逆转录聚合酶链反应（Real time RT-PCR）和蛋白免疫印迹法（WB）检测药物作用前后Bcl-2，Bax，p53，Fas和Caspase-3的mRNA和蛋白水平。
结果:
（1）流式结果表明：①单用MNP（Fe3O4）或5-BrTet时K562/A02细胞的凋亡情况：K562/A02细胞48h凋亡率为（4.33±0.40）％，10μg/ml MNP（Fe3O4）和0.35μg/ml5-BrTet分别单独作用于K562/A02细胞48h凋亡率分别为（4.60±0.62）％及（4.27±0.81）％；②联合MNP（Fe3O4）或5-BrTet和DNR时K562/A02细胞的凋亡情况：空白对照组，1.0μg/mlDNR组，DNR1.0μg/ml+MNP（Fe3O4）10μg/ml组，DNR1.0μg/ml+5-BrTet0.35μg/ml和DNR1.0μg/ml+MNP（Fe3O4）10μg/ml+5-BrTet0.35μg/ml组的48h凋亡率分别为（4.03±0.61）％，（8.30±0.40）％，（15.60±0.76）％，（19.53±0.67）％及（40.20±1.49）％；③联合MNP（Fe3O4）或5-BrTet和DNR时K562细胞的凋亡情况：空白对照组，1.0μg/mlDNR组，DNR1.0μg/ml+MNP（Fe3O4）10μg/ml组，DNR1.0μg/ml+5-BrTet0.35μg/ml组和DNR1.0μg/ml+MNP（Fe3O4）10μg/ml+5-BrTet0.35μg/ml组的48h凋亡率分别为（4.33±0.45）％，（51.53±0.71）％，（55.13±1.32）％，（52.60±0.70）％及（55.23±1.33）％。
（2）联合小剂量DNR（1.0μg/ml），MNP（Fe3O4）及5-BrTet作用于K562/A02细胞48h后，光镜下可见细胞胞体固缩、核固缩、核碎裂及凋亡小体等典型凋亡形态改变，DNA琼脂糖凝胶电泳可见梯状条带；大剂量的化疗药物（20μg/ml的DNR）作用于K562/A02细胞48h后导致大量细胞呈现胞体肿大、核破碎、胞膜破裂、内容物释放等坏死改变，DNA电泳呈弥散改变。
（3）当MNP（Fe3O4）和5-BrTet联合DNR作用于K562/A02细胞48h后，Bcl-2 mRNA和蛋白水平下调，Bax，p53，Fas和Caspase-3 mRNA和蛋白水平上调，与凋亡率变化情况呈正相关。
结论:
（1）MNP（Fe3O4）或5-BrTet单独应用时并不能增加K562/A02细胞凋亡率；MNP（Fe3O4）或5-BrTet联合DNR后均能有效促进K562/A02细胞凋亡，三药联合应用时作用更强；5-BrTet联合DNR较单用DNR促进K562细胞凋亡的作用无明显差异，而MNP（Fe3O4）联合DNR或三药联合作用K562细胞后凋亡率较单用DNR提高。
（2）经MNP（Fe3O4）和5-BrTet联合DNR处理K562/A02细胞48h后，细胞出现典型的凋亡特征，不同于大剂量化疗导致肿瘤细胞坏死。
（3）MNP（Fe3O4），5-BrTet及DNR协同逆转MDR的机制可能与耐药细胞Bcl-2转录与表达下调，Bax，p53，Fas和Caspase-3转录与表达上调有关。