【摘 要】
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蜜环菌是一类具有重要价值的担子菌,同时也是中药天麻的共生真菌。为了解鄂西地区野生蜜环菌生物种遗传多样性以及目前市场上天麻栽培用商品种蜜环菌的生物种类型,筛选出优良的天麻栽培用蜜环菌菌株。本文对鄂西地区的湖北宜昌市下辖的夷陵区和五峰县,神农架自然保护区,恩施土家族苗族自治州所辖的鹤峰、来凤和利川等地的野生蜜环菌进行广泛地采样,共采集到45个样本。在进行单孢分离和培养的基础上,通过使用交配试验和分子生
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蜜环菌是一类具有重要价值的担子菌,同时也是中药天麻的共生真菌。为了解鄂西地区野生蜜环菌生物种遗传多样性以及目前市场上天麻栽培用商品种蜜环菌的生物种类型,筛选出优良的天麻栽培用蜜环菌菌株。本文对鄂西地区的湖北宜昌市下辖的夷陵区和五峰县,神农架自然保护区,恩施土家族苗族自治州所辖的鹤峰、来凤和利川等地的野生蜜环菌进行广泛地采样,共采集到45个样本。在进行单孢分离和培养的基础上,通过使用交配试验和分子生物学技术相结合的方法对这些蜜环菌进行生物种鉴定和遗传多样性分析。同时用分子生物学技术对全国不同省市的菌种市场上购买到19株商品种蜜环菌菌株进行遗传多样性分析,并比较它们在皿内和菌材上菌索的生长特性以及漆酶和木聚糖酶活性,为筛选具有优良性状的蜜环菌菌株提供可靠依据。鄂西地区的野生蜜环菌共鉴定出6个不同的生物种类型,分别为CBS L、CBS J、CBS N、CBS O、CBS F和Armillaria mellea。这些蜜环菌共形成4个clade,CBS L与CBS N形成cladeⅠ,CBS J与CBS O形成cladeⅡ,其余2个生物种各自形成不同的clade。在45个蜜环菌样本中,24个蜜环菌样本鉴定为CBS L,分布最为广泛,是鄂西地区的优势菌株;9个样本鉴定为CBS J,该种在神农架和五峰地区都有分布;9个样本鉴定为CBS N,该种主要集中分布在宜昌五峰地区。其中蜜环菌CBS O、CBS F和Armillaria mellea都只采集到1个样本,分别采自宜昌夷陵区、恩施鹤峰和宜昌市下堡坪地区。其中CBS L,CBS N,CBS O首次在湖北地区报道,扩大了这3个生物种的分布范围。结合以往鉴定的鄂西蜜环菌生物种CBS M和CBS P,鄂西目前发现的蜜环菌生物种达到8个不同类别,说明该地区蜜环菌的多样性的确丰富。通过对购买自湖北、陕西和贵州等9个省市的19株商品种蜜环菌菌株进行遗传多样性分析,序列分析发现包含4个不同的生物种类型,其中16株商品蜜环菌聚集在一起形成cladeⅢ,另外3个商品种菌株聚在一起形成cladeⅤ,说明这些商品种蜜环菌菌株的多样性并不丰富,可能是同一个来源。通过研究野生蜜环菌和商品种蜜环菌的二倍体菌株在皿内和菌材的菌索生长特性,比较菌索生物量的大小,商品种蜜环菌菌索的生物量要普遍高于野生蜜环菌生物种,但18001(Armillaria mellea)菌索的生物量要高于大部分商品种;而在蜜环菌漆酶和木聚糖酶的活力方面,我们发现16022(CBS N)菌株的木聚糖酶最大酶活要高于其它菌株,16032(CBS O)菌株漆酶和木聚糖酶的最大酶活也都高于大部分菌株。结合菌索生长特性和胞外水解酶活性的研究,总体上商品种的性状要优于鄂西的野生蜜环菌生物种,我们从鄂西地区的野生蜜环菌中筛选出3个具有优良性状的菌株,分别为16022(CBS N)、16032(CBS O)和18001(Armillaria mellea),其实际栽培潜力还需要进一步研究。
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