论文部分内容阅读
近些年来杀扑磷对水体的污染已引起人们的关注。杀扑磷是一种较理想的杀介壳虫药剂,毒性强,效果好,可以用于防治大多数农作物上的蚧壳虫等害虫。因它在农产品,水体等中不易分解,在一些农作物上已被禁止使用,目前杀扑磷的使用虽大量减少,但因对蚧壳虫防治的特效,依然存在农户的滥用现象,进入水体而造成水体环境系统的破坏。本论文通过染毒试验,对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)幼鱼毒理代谢的影响,主要研究结果如下:1.杀扑磷(Methidathion,MD)对尼罗罗非鱼急性毒理研究。对罗非鱼暴露于杀扑磷农药96 h的半数致死剂量(96 h-LC50)进行了评估,试验选取初始体重60±0.5 g,分为6个实验浓度梯度组0、7.52、10.94、15.83、22.87、33.09μg L-1,每组3个重复,每一个重复10尾鱼,试验周期为96 h,试验期间鱼类禁食。结果表明:杀扑磷96 h-LC50为15.83μg L-1,最大无影响浓度(No observed effect concentration,NOEC)为1.75μg L-1,最低可观察效应浓度(Lowest observed effect concentration,LOEC)为6.51μg L-1。2.设计了杀扑磷浓度为0.00(N0)、0.80(N1)、1.67(N2)、5.34(N3)、7.49(N4)、15.83(N5)μg L-1对罗非鱼开展亚急性毒理试验,罗非鱼初始体重60±0.5 g,每组3个重复,每一个重复30尾鱼,试验周期为12d。结果表明:暴露于不同浓度杀扑磷农药第3 d、6 d、9 d、12 d后,尼罗罗非鱼肝脏和血清中的乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)均受到抑制作用,且随着杀扑磷浓度的上升,AChE的活性越低,与对照组相比存在显著差异(P<0.05)。暴露于杀扑磷农药3 d后,与对照组相比实验组N4和N5罗非鱼肝脏中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量降低,实验组N1、N2和N3肝脏中丙二醛(MDA)含量升高,存在显著差异(P<0.05),在血清中仅实验组(N5)MDA含量降低;在第6 d、9 d、和12 d肝脏中MDA含量随着杀扑磷浓度上升呈现先抑制再提高的趋势,而在血清中仅在第6 d实验组(N5)MDA下降,整体呈现诱导上升的趋势。暴露于杀扑磷农药3 d后肝脏和血清中超氧化歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活性实验组与对照组相比有显著性差异(P<0.05),超氧化歧化酶(SOD)活性下降;在6 d、9 d发现肝脏中试验组低于对照组,血清中试验组N4、N5的SOD活性高于对照组,但随着杀扑磷浓度提高,SOD活性均呈现下降后升高的趋势;而在第12 d,肝脏中试验组各浓度SOD活性与对照组相比提高,随杀扑磷浓度呈上升趋势。血清中试验组N3、N4、N5 SOD活性高于对照组,试验组N1、N2低于对照组,整体随着杀扑磷浓度上升SOD活性呈现先下降后上升的趋势。在第3 d罗非鱼肝脏和血清中,与对照组相比过氧化氢酶(Catalase,CAT)在N1和N5实验组活性下降,而在N2、N3和N4实验组CAT活性提高;在6 d、9 d和12 d,随着杀扑磷浓度升高,肝脏中CAT活性呈现先下降后上升再下降的趋势,血清中CAT活性呈现先下降后上升的趋势,与对照组相比存在显著差异(P<0.05)。同时在时间效应上,随着杀扑磷攻毒的时间,各试验组抗氧化酶活呈现出相应的非线性趋势模型变化。3.尼罗罗非鱼染毒12 d后结果表明:杀扑磷引起肝细胞形态发生变化,肝细胞坏死,细胞核固缩,局部中央静脉周围肝细胞水肿变性,且随浓度增高出现肝细胞空泡现象,胞质疏松其内可见嗜酸性团状物;鳃局部可见血细胞淤积,鳃小片坏死脱落,上皮细胞与基膜脱离并出现肥大水肿状况。4.实验结果表明,罗非鱼攻毒12 d后热休克蛋白70(Heat Shock Protein 70,HSP70)、细胞色素C氧化酶亚基7B(Cytochrome c oxidase subunit 7B,COX7B)和细胞色素P450 1B1(Cytochrome P450 1B1,CYP1B1)较对照组明显降低,磷脂酶A2(Phospholipase A2,PLA2)基因被上调,而细胞色素P450 1A(Cytochrome P450 1A,CYP1A)在N1、N2、N3和N4组中明显上调,N5组被下调;NADPH细胞色素P450还原酶(NADPH--cytochrome P450 reductase,CYPOR)试验组N1、N2均有明显上调,而试验组N3、N4和N5与对照组相比有下调趋势。实验选择N0、N2和N4的肝脏组织,每组两个平行,对罗非鱼肝脏组织进行转录组测定分析,转录组测序结果显示:与对照组相比,N4组表达上调基因有76个,表达下调基因有244个;N2组表达上调基因有182个,表达下调基因有396个。N4组与N2组相比表达上调基因有119个,表达下调基因有244个。