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长期阻碍结核病血清学诊断方法进一步发展的是种特异性和疾病特异性的结核杆菌抗原的纯化及由其单克隆抗体的成功研制.国外在这方面的研究已经取得了很大成就,发现38kD抗原及其单克隆抗体对结核病诊断具有较高的敏感性(89%)和特异性(97%),其诊断价值不逊于目前广为应用的诊断方法,如结核菌素试验等,而且可以弥补这些方法的不足.国内目前还没有开展这方面的研究.该研究的目的就是要利用38kD纯抗原研制其单克隆抗体,并初步应用获得的单克隆抗体对结核病进行鉴别诊断.该研究采用Davis等创建的方法,在甲基纤维素半固体培养基上进行融合细胞的克隆化.主杂步骤是:在常规免疫和细胞融合后,将细胞接种到含有甲基纤维素、IMDM和HAT等的半固体培养基上,5-7天后肉眼可见培养基中长出许多由杂交细胞形成的集落.将这些集落挑选到含有DMEM、15%FCS和HAT的液体培养基内继续培养,得到1824株克隆,经固相酶联免疫方法筛选得到12株阳性克隆,对其中的6株进一步研究,结果发现,它们的染色体众数均在96-105之间,均分泌IgGl类抗体,测得的亲和常数分别是4.04×10<8>L/mol、4.55×10<7>L/mol、6.96×10<7>L/mol、3.25×10<8>L/mol、1.06×10<8>L/mol、4.21×10<7>L/mol.用Western blot方法鉴定的抗体特异性高,与其它抗原成份未发生交叉反应.用ELISA(竞争法)对35例病人和10例健康对照者血标本初步检测的敏感性、特异性分别是37.14%和90%.该课题结果表明:半固体培养基上进行融合细胞的克隆化是一个比较好的方法,成功率高;纯化38kD及其单克隆抗体的反应特异性强,结合率高,用于结核病诊断的特异性很高,但敏感性需要进一步研究提高.