【摘 要】
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MYC是著名的癌基因，在众多恶性肿瘤中呈现异常表达，它的过量表达对肿瘤的发生与发展具有显著的促进作用。已知MYC基因受到诸如启动子、转录因子、表观遗传状态以及增强子等多层
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MYC是著名的癌基因，在众多恶性肿瘤中呈现异常表达，它的过量表达对肿瘤的发生与发展具有显著的促进作用。已知MYC基因受到诸如启动子、转录因子、表观遗传状态以及增强子等多层次复杂调控，多种调控方式确保了MYC基因的表达受到严格且精密的调控。已报道8q24区域含有MYC基因的远端增强子，这些增强子可与MYC启动子形成染色质环结构，实现对MYC基因的近距离调控。然而MYC远端增强子调控MYC基因表达的分子机制并不清晰。 长非编码RNA(long noncoding RNAs，lncRNAs)一般是指长度大于200个核苷酸、不具有蛋白质编码功能的长链RNA分子。近年来的研究研究表明lncRNAs在哺乳动物细胞中发挥着重要功能，比如参与干细胞多能性维持和体细胞重编程、细胞分化以及生物体发育等多项生命活动的调控。特别的是lncRNAs与人类的许多重大疾病（如癌症）具有直接的关联，研究lncRNAs在疾病中的功能对于研究疾病发生发展具有重要的意义。 为研究lncRNAs在结肠癌中的功能，本学位论文通过从临床样本出发，通过转录组测序筛选结肠癌特异表达的长非编码RNA，并研究这些lncRNAs在结肠癌发生和发展中的作用。 本学位论文寻找到一条仅特异在结肠癌组织和细胞中高表达的长非编码RNACCAT1-L。CCAT1-L转录产生于MYC基因上游约500Kb处的一个超级增强子，转录产生后定位于其转录位点附近，增强MYC基因上游的超级增强子与MYC启动子之间形成的长距离染色质环结构，从而促进MYC基因表达。敲除CCAT1-L减弱了MYC启动子与该超级增强子之间的染色质环结构。进一步研究发现，CCAT1-L与染色质组织蛋白CTCF相互作用，参与调节该区域染色质构象。本学位论文的研究揭示了一条全新的长非编码RNA在MYC转录调控中的重要作用。 同时，本学位论文提出了一种全新的长非编码过表达方式-顺式过表达，创造性地利用TALEN基因组编辑技术实现了长非编码RNA在顺式水平的激活表达，巧妙地克服了利用传统功能获得性实验(Gain of Function)会导致长非编码RNA亚细胞定位不正确的问题。这种顺式激活实验为研究发挥顺式调控功能的长非编码RNA提供了一种更可靠的功能获得性实验策略。
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