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宫颈癌(cervical carcinoma)的发病率在女性恶性肿瘤中居第三位,仅次于乳腺癌。其死亡率高居第二位,严重危害女性健康。中晚期宫颈癌患者治疗以放化疗为主顺铂(Cisplatin,DDP)作为治疗宫颈癌的一线化疗药物在临床中使用广泛。然而治疗过程中产生的获得性耐药是其难治愈的原因之一。为探究潜在的顺铂耐药分子机制,我们在本研究中建立了人宫颈癌细胞顺铂耐药细胞系模型Hela/DDP,随后通过转录组测序(Transcriptome Sequencing,RNA-Seq)检测与Hela/DDP与Hela细胞中转录本表达。分析后筛选获得性耐药相关的差异表达基因。通过RNA-Seq数据比较人Hela/DDP与其亲本细胞系Hela的基因相对表达量,结果发现2,312个差异表达基因(Differentially Expressed Genes,DEGs)。其中包括1,437个上调基因和875个下调基因。将DEGs在GO,COG和KEGG数据库进行聚类分析。根据KEGG数据库分析结果,细胞中差异表达基因富集最多的信号通路为PI3K/AKT信号通路。实时荧光定量PCR(RT-q PCR)实验初步验证显示六个上调基因:WNT10B,INHBB,CACNA1H,HSP90B1,CREB5和AKT3,与八个下调基因SIPA1L1,FLNC,LAMA4,CD70,PDGFC,CREB3L1,COL4A6和IL1A的m RNA相对表达量与测序结果一致。进一步研究AKT3基因的功能。由于AKT3在Hela/DDP细胞中高表达,因此通过RNAi干扰实验与抑制剂处理后,q RT-PCR实验均表明AKT3表达量下降,Western Blot结果显示p AKT表达被抑制。CCK-8实验表明低表达的AKT3/p AKT加强耐药细胞对顺铂的敏感性。细胞凋亡结果表明抑制AKT3表达后,Hela/DDP凋亡率增加。基于上述实验结果,本研究中发现AKT3高表达或是导致宫颈癌细胞产生对顺铂的耐受性的分子机制之一,也许能对抑制或逆转宫颈癌顺铂耐药的策略提供一定的实验依据。