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本文对实验室筛选的两株高产耐热菊粉酶的Bacillus smithii菌株,优化条件下进行产酶发酵,分离纯化得到耐热菊粉酶,研究其酶学性质,应用化学修饰的方法表征影响耐热菊粉酶活性的关键氨基酸组成,探讨其催化作用机理和耐热机制。优化培养Bacillus smithii T4,离心收集发酵上清液,通过硫酸铵分级沉淀、透析脱盐、Sepharose Q-FF、DEAE-Sepharose CL-6B离子交换层析和Superdex 75凝胶过滤层析得到纯化的菊粉酶,SDS-PAGE检测为单一条带