论文部分内容阅读
目的:检测大鼠角膜碱烧伤后新生血管形成过程中水通道蛋白1(AQP1)的分布情况以及不同时期的表达变化，探讨其在角膜新生血管形成中的作用和相关作用机制，为临床治疗角膜新生血管提供新的思路。
方法:25只SD 大鼠随机分成5组，每组5只，右眼作为正常对照组，左眼作为实验组。左眼使用碱烧伤进行诱导角膜新生血管模型，右眼以生理盐水代替氢氧化钠作为正常对照组。每日裂隙灯下观察并记录角膜新生血管的发展。分别于角膜碱烧伤后1d，4d，7d，14d，21d分批处死后取角膜组织，采用免疫组织化学方法检测 AQP1和VEGF的表达以及分布情况，同时使用RT-PCR对AQP1 进行定量分析。
结果:大鼠角膜碱烧伤后新生血管形成于第4 天到第7天时生长最旺盛，第14天后开始逐渐退化免疫组化结果显示：1.在正常大鼠角膜组织中，AQP1 仅表达于角膜内皮层，碱烧伤后1 天时，AQP1 免疫活性开始增强，主要分布于上皮层和基质层，且于第7天时表达最强，14 天时下降，21 天时仍有弱表达(t1d=7.623，t4d=15.293，t7d=18.291，t14d=14.483,t21d=6.381，P均<0.05)。
2.在正常大鼠角膜组织中，VEGF 不表达或弱表达，碱烧伤后1 天时，VEGF 免疫活性开始增强，于第4 天时表达最强，7天后表达开始下降，14 天时仍见表达增强(t1d=12.410，t4d=29.428，t7d=16.030，t14d=13.321，P均<0.05)。21d组增高不明显，差异无统计学意义(t21d=1.587，P＞0.05)。
3. 免疫组化结果表明VEGF 与AQP1在大鼠碱烧伤新生血管形成中的表达变化时间分布相似，二者之间呈正相关关系(r=0.834，p<0.05)。RT-PCR 结果显示在大鼠角膜碱烧伤新生血管形成后AQP1表达明显增强，明显高于对照组，由碱烧伤后第1 天开始逐渐增强，在第7天表达最明显，14 天后表达逐渐减弱(t1d=3.491，t4d=10.690,t7d=12.936，t14d=10.767，t21d=8.594 P<0.05)。
结论: AQP1在大鼠角膜碱烧伤后角膜中表达水平明显增加与新生血管形成具有明显相关性。在大鼠角膜碱烧伤后新生血管形成中，AQP1 与VEGF 二者之间呈正相关关系。