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背景心血管病变是糖尿病的主要并发症和致死原因,而动脉粥样硬化是其心血管并发症的主要病理表现。大量的研究证实,2型糖尿病和动脉粥样硬化可能是同一病理生理基础上平行发展的两种疾病,它们的共同基础是慢性亚临床炎症。虽然已证实,糖尿病患者血液中多种炎性介质均呈明显增高趋势,但其炎症发生的真正原因还不明了。最新的研究表明,细菌来源的脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)可能是引起糖尿病慢性亚临床炎症的真正始发因子。肠道是人体最大的细菌和LPS贮存场所。由于正常人体肠上皮细胞能作为物理及功能上的屏障以防止LPS转位,因此正常人体血液中的LPS水平非常低。所以我们推测,糖尿病血液LPS增加可能与肠上皮屏障功能减弱导致LPS转位有关。此外,糖尿病患者与健康人相比,受LPS刺激时所引发的炎症反应更加强烈。目前,已有大量证据显示糖尿病患者内皮功能异常是血管并发症的始发因素,且在心血管疾病的炎症机制中起了重要的作用。故我们推测,高糖条件下,血管内皮细胞对LPS刺激更为敏感。目的1.阐明高脂饮食诱导的胰岛素抵抗小鼠其血液LPS水平的升高是否与肠上皮细胞增殖能力下降引起的肠道屏障功能改变有关。2.明确高糖能否加重LPS诱导的血管内皮细胞的炎症反应并探究其可能机制。方-法1.动物实验部分：用高脂饮食诱发小鼠胰岛素抵抗模型。ELISA法测定血清LPS水平。利用稳态模型评价胰岛素抵抗指数。D-木糖吸收实验测定肠黏膜通透性。免疫组织化学法观察Brdu染色阳性的细胞数,计算肠上皮细胞的增殖指数。2.细胞实验部分：人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)用不同浓度的葡萄糖(5.5,25,50mmol/L)和/或不同浓度的LPS(0,10,100,1000gg/L)孵育24h。ELISA法测定培养上清液中IL-6和TNF-a水平。Western blot去测定目标蛋白表达。结果1.动物实验部分：高脂饲料喂养8周后小鼠胰岛素抵抗指数明显高于正常对照组,血清LPS水平明显增高,小鼠对D-木糖吸收量明显增加(P<0.01)；高脂饲料喂养8周后小鼠空肠隐窝中平均BrDu阳性细胞数减少,BrDu阳性细胞百分比下降(P<0.01)。2.细胞实验部分：与正常糖浓度组相比,细胞在高糖环境下,同样浓度的LPS引起的血管内皮细胞上清TNF-a和IL-6水平明显增高(P<0.05)。虽然单纯25mmol/L高糖或100μg/L LPS孵育细胞对TLR2蛋白表达无明显影响,但两者共同孵育细胞,可诱导TLR2表达显著增加。而各组TLR4的表达却无显著变化。提示高糖和LPS对TLR2的表达有协同作用。此外,高糖和LPS共同孵育血管内皮细胞后,细胞核内NF-κB蛋白表达也显著增加(P<0.01)。结论1.高脂饮食诱导的小鼠代谢性内毒素血症可能与肠上皮细胞的增殖修复能力下降引起的肠道屏障功能改变有关。2.高糖可加重LPS诱导的血管内皮细胞炎症反应,其机制可能与高血糖诱导的NF-κB依赖性TLR2表达增加有关。