PRPD技术在肺炎克雷伯氏菌DNA多态性分析中的应用

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肺炎克雷伯氏菌是重要的条件致病菌,常常引起老人及婴幼儿重症护理病房的交叉感染及暴发流行,追踪其传染源尤为重要,帮多年来许多学者致力于细菌的克隆识别研究.1990年Williams等<[11,16]>提出了一种新的遗传标记法,即随机引物PCR法(arbitrarily primer PCR)或称RAPD(randomly amplified polymorphic DNA).该法最终能对随机扩增了的DNA多态性进行分析,以判断菌株间差别大小、亲缘关系并绘制系统树.作者于1996年9月---1997年11月在哈市及齐市共收集52株肺炎克雷伯氏菌、30株金黄色葡萄球菌、10株绿脓杆菌,分别用两种10bp、17bp随机引物为以上菌株作了RAPD,结果52株肺炎克雷伯菌分为43各型别,30株金黄色葡萄球菌分为4个型别,10株绿脓杆菌分为8个型别.用17bp引物对52株肺炎克雷伯氏菌的RAPD谱型作了相似系数的计算,根据相似系数来判断各菌株间的亲缘关系,并绘制了系统树.以上结果说明RAPD技术在区别种间细菌DNA差异方面敏感性好、分辨率高、且其费用低、操作比Ribotyping、PFGE法简易便易行,在传染病学、流行病学、院内感染学和系统发生学上有很强的实用性和广阔的应用前景.
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