论文部分内容阅读
目的：检测厦门地区临床分离的鲍曼不动杆菌耐药现状及使用外排泵抑制剂后耐药性的改变;从分子生物学水平研究鲍曼不动杆菌adeABC主动外排泵基因的表达水平,并探讨该基因表达与其他地区的相关报道有无差异,并进一步分析adeABC外排泵与细菌耐药性之间的相关性,从而为研究鲍曼不动杆菌多重耐药机制及预防其耐药性扩散提供科学依据。 方法：(1)收集临床分离的鲍曼不动杆菌,用纸片扩散法检测其对青霉素类、头孢菌素类、氟喹诺酮类、氨基糖苷类、四环素、多黏菌素B类以及复合类抗生素等多种抗生素的耐药情况,从而对当前鲍曼不动杆菌耐药性现状做一分析;对耐药株加用泵抑制剂利血平后再检测其耐药性;(2)提取所收集的鲍曼不动杆菌基因作为模板,利用PCR扩增技术对目的基因adeB及调控基因adeR、adeS进行筛选,探讨目的基因在敏感株和耐药株表达有无差异;(3)利用实时荧光定量PCR(realtimePCR,RT-PCR)技术检测adeB基因表达情况,进一步分析其与外排表型、基因型及耐药性之间的关系。 结果：(1)本实验中180株鲍曼不动杆菌对所用的几种抗生素耐药率如下:哌拉西林93.3％、头孢吡肟60.0%、头孢噻肟74.7%、头孢他啶74.7%、环丙沙星80.0%、左氧氟沙星78.7%、阿米卡星66.7%、庆大霉素60.7%、亚胺培南15.6%、多粘菌素B0%、哌拉西林/他唑巴坦17.8%;加入外排泵抑制剂后细菌耐药情况如下,哌拉西林69.4%、头孢吡肟47.2%、头孢噻肟47.2%、头孢他啶47.7%、环丙沙星62.2%、左氧氟沙星58.9%、阿米卡星42.2%、庆大霉素48.9%、亚胺培南7.2%、多粘菌素B0%、哌拉西林/他唑巴坦10.5%;(2)adeB基因在敏感株和耐药株中均有表达,adeB虽非鲍曼不动杆菌固有基因,但在该菌中分布广泛,且在耐药株中表达高于敏感株;(3)adeABC基因的高表达与细菌耐药性相关,其过度表达与亚胺培南耐药有关,并可能介导对复合类抗生素耐药,导致多重耐药甚至泛耐药现象。 结论：(1)目前鲍曼不动杆菌对抗生素耐药情况仍较严重,多重耐药甚至泛耐药菌株在临床并不少见;(2)使用泵抑制剂可使细菌耐药性降低;(3)耐药株较敏感株adeB基因表达水平要高;(4)AdeABC外排泵表达增强是鲍曼不动杆菌产生耐药性的重要机制之一;(5)本地区adeB基因表达与其他地区报道一致。