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目的：制备、鉴定抗醛糖还原酶相似蛋白(aldose reductase-like protein，ARL-1)多克隆抗体.
方法：将arl-1基因插入大肠杆菌表达载体pGEX-4T-l(His)<,6>C和pQE-30。然后诱导表达ARL-1重组蛋白ARL-(His)<,6>和ARL-GST。重组蛋白采用亲和层析纯化。用ARL-(His)<,6>免疫家兔制备抗血清，以ARL-GST为配基制备亲和层析柱纯化抗血清，得到抗ARL-1多克隆抗体，多克隆抗体采用western blotting鉴定。
结果：分子量为35.7 KD的重组蛋白ARL-(His)<,6>和分子量为60.8KD的重组蛋白ARL-GST都高度表达；表达水平分别占总蛋白的27.7﹪和15.1﹪。重组蛋白为可溶性的，主要集中在上清。采用非变性的方法纯化后，SDS-PAGE显示为一条带。在多克隆抗体纯化过程中只见到一个洗脱峰。Western blotting表明阳性信号只在两种纯化的重组蛋白和分别转有pGEX-4T-l(His)<,6>C-ARL、pQE-30-ARL的大肠杆菌裂解液中见到。
结论：制备了高度纯化和高度特异性的抗ARL-1多克隆抗体。重组蛋白ARL-GST、ARL-(His)<,6>得到高表达和高度纯化。
目的：研究ARL-1在正常人和肝癌患者组织及血清中的蛋白表达水平的差异，探讨ARL-1能否作为一种新的肝癌血清标志物应用于肝癌的早期诊断。
方法：应用抗ARL-1多克隆抗体，采用western bloaing检测组织中的ARL-1蛋白，采用ELISA检测血清中的ARL-1抗原。
结果：微量的ARL-1蛋白在许多正常组织中发现，包括十二指肠，小肠，升结肠，胆囊;但在肝脏，食管，胃，直肠，腹膜，卵巢，子宫，肾脏，扁桃体和睾丸没有发现ARL-1蛋白。ARL-1蛋白在94.4﹪(17/18)的肝癌组织表达，在82.4﹪(14/17)的相应癌旁组织表达。重要的是在肝癌组织ARL-1蛋白表达水平比癌旁组织高：在5例正常肝组织都没有检测到ARL-1蛋白。类似，在 4 种肝癌细胞系HepG-2、BEL-7402、QGY-7701、SMMC-7721和一种胚肝细胞系L-02检测到ARL-1蛋白，但在一种(源于成人肝外周组织)肝细胞系QSG-7701和鳞状细胞系Hacat没有检测到ARL-1蛋白。正常人血清ARL．1蛋白水平为24.81±2.51 ng/ml。我们将血清ARL-1蛋白高于27.32 ng/ml定为ARL-1阳性。在检测的108例肝癌血清，ARI-1阳性率为41.67﹪，AFP阳性率为60.19﹪，两者结合起来阳性率(只要ARL-1和AFP任何一种为阳性或两者都为阳性)为82.41﹪。
结论：ARL-1蛋白在肝癌组织及血清中表达水平上调，血清检测ARL-1抗原可以作为一种分子标志诊断肝癌。