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目的:构建TBX18慢病毒载体并在体外转染白色脂肪干细胞(ADSCs)，观察其能否诱导ADSCs向起搏样细胞分化。 方法:取50gSD大鼠双侧腹股沟脂肪，用酶消化法分离培养ADSCs，光学显微镜下观察细胞形态，将细胞随机地分为lenti-TBX18-GFP组(n=6)、lenti-GFP组(n=6)、null组(n=6)，lenti-TBX18-GFP组转染同时携带TBX18转录因子和绿色荧光蛋白(GFP)的TBX18慢病毒载体，lenti-GFP组转染等量的GFP慢病毒作为空病毒对照组，null组不转染病毒作为空白对照组。一周后通过蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测三组相关转录因子TBX3、ISL1、SHOX2，缝隙连接蛋白CX45、CX43、CX30.2及心肌细胞特异性标志物心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTNⅠ)、肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达量;通过免疫荧光技术检测lenti-TBX18-GFP组及lenti-GFP组的α-SMA蛋白的表达。病毒转染后第7天、14天、21天、28天分别采用实时荧光定量聚合酶链式反(RT-PCR)检测lenti-TBX18-GFP组及lenti-GFP组TBX18及HCN4水平。 结果:lenti-TBX18-GFP组转染ADSCs后，细胞形态发生改变，转染后4周内可通过荧光显微镜下观察到持续的荧光表达，诱导分化后，Western blotting显示lenti-TBX18-GFP组TBX3，ISL1，SHOX2，CX45，CX30.2，cTNⅠ，α-SMA蛋白水平升高，明显高于lenti-GFP组及null组;而Cx43与lenti-GFP组差异不大，但显著低于null组，;lenti-TBX18-GFP组免疫荧光检测到了α-SMA，而lenti-GFP组表达阴性;RT-PCR结果显示lenti-TBX18-GFP组TBX18及HCN4表达在慢病毒装染后4周内续表达，明显高于lenti-GFP组，具有统计学意义(P＜0.05)。 结论:TBX18慢病毒载体能够在体外转染入ADSCs，且能在细胞内稳定表达;能使ADSCs向起搏样细胞分化。