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类固醇激素主要由禽类卵巢和卵泡分泌,受到促性腺激素的调控,而胆固醇作为类固醇激素合成的前体物质,在细胞内的代谢平衡也能调控类固醇激素在体内的含量和生物活性。胆固醇在卵泡合成类固醇激素过程中的转运主要通过蛋白质介导,前期研究报道,受SREBP-2和胆固醇特异性调控的STARD4可以将细胞内的胆固醇转运到线粒体外膜,再由StAR转运到线粒体内膜,进一步由P450scc转化为孕烯醇酮,因此本研究通过检测SREBP-2、STARD4、StAR、P450scc在鹅各发育阶段卵泡中的表达模式,结合各阶段的类固醇激素的分泌水平来初步探讨这四个基因在类固醇激素合成过程中的作用,研究这四个基因在卵泡类固醇激素合成中的功能,并以鹅F1卵泡的颗粒细胞为研究载体,用不同浓度的胆固醇、25-羟胆固醇和Mevinolin来处理鹅颗粒细胞,打破细胞内胆固醇代谢平衡后检测这四个基因的mRNA表达量和颗粒细胞外孕酮水平,进一步探讨这四个基因在鹅卵泡类固醇激素合成中的作用。主要研究结果如下：(1)获得了鹅STARD4、StAR、P450scc基因CDs区的部分序列,分别为655bp、512bp、574bp。核苷酸同源性分析表明,三个基因与鸡的同源性分别为89%、88%、90%。(2)基因SREBP-2、STARD4、StAR、P450scc在鹅各发育阶段的卵泡中均有表达,但在凋亡卵泡和排卵后卵泡(POF)中的表达量较低,在排卵前卵泡和直径为2-4mm的的卵泡中表达量较高。(3)用不同浓度的胆固醇对鹅F1卵泡的颗粒细胞进行处理,发现15μg/mL的胆固醇能增加颗粒细胞活性,25μg/mL的胆固醇对颗粒细胞孕酮的分泌有一定的抑制作用。与对照组比较,StAR、P450scc基因的mRNA表达量都随着胆固醇的处理浓度的增加而逐渐升高且差异显著(P<0.05); SREBP-2和STARD4的表达模式相反,SREBP-2的mRNA表达量在15μg/mL处理组表达下降,而STARD4的mRNA表达量在25μg/mL处理组表达下降。(4)添加25-羟胆固醇能抑制颗粒细胞活性,浓度越高,细胞活性越低,但对颗粒细胞孕酮的分泌影响不明显(P>0.05)。25-羟胆固醇能显著抑制StAR和SREBP-2基因mRNA的表达水平,不同处理浓度对P450scc基因的mRNA表达影响不显著,但有一定的抑制趋势,对STARD4基因mRNA表达却有一定的促进作用。(5)添加Mevinolin对颗粒细胞活性有一定的抑制作用,对颗粒细胞孕酮的分泌影响不明显(P>0.05)。Mevinolin显著抑制了StAR基因mRNA的表达水平(P<0.05),与对照组比较,0.1μg/mL处理组对P450scc基因的mRNA表达有一定的抑制作用,当浓度为1μg/mL时该基因mRNA表达显著上升(P<0.05),当浓度达到10μg/mL时该基因的mRNA表达又下降.Mevinolin对SREBP-2和STARD4的mRNA表达具有一定的促进作用,当浓度为1μg/mL时对STARD4的促进作用最大(P<0.05)。