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目的：对蜂毒素分子结构进行改造，并观察改造后的蜂毒素类似物对体外溶血及抗肝癌作用的影响。 方法：1.蜂毒素分子结构改造。首先，采用固相合成的方法切去7个氨基酸，从羧基端向氨基端，将每个氨基酸依次接在树脂上，重新合成含19个氨基酸的蜂毒素类似物(1)。其次，对氨基酸残基进行替换，将Melittin疏水区(6-16)中的有溶血位点第9、13及第16位的亮氨酸残基替换为丙氨酸。最后，将部分氨基酸残基由L型替换为D型。2.非免疫性溶血筛选：采用新鲜兔血制备红细胞悬液，随机分为生理盐水组，蜂毒素标准品组和不同剂量蜂毒素类似物组。每1小时观察一次，连续观察3小时，以酶联免疫检测仪读取各时间段离心所得上清液OD值。3.选用三种人肝癌细胞株(Bel-7402、HepG2、SMMC-7721)，应用MTT法检测不同浓度蜂毒素标准品及蜂毒素类似物对不同人肝癌细胞株的抑制作用。 结果：1.改造后的蜂毒素类似物M1-M4质谱检验分子量均与预计的分子量相符，产率均在90％以上。2.标准品Mel在一定浓度下可引起明显的溶血反应，当Mel的浓度为500ng/ml时，兔红细胞的溶血率>5％，即发生溶血。而四种类似物的浓度达到1250ng/ml时，兔红细胞溶血率均<5％，未发生溶血，差异有统计学意义(P<0.05)。3.改造后的蜂毒素类似物对于三种人肝癌细胞BEL-7402、HepG2、SMMC-7721具有一定的抑制增殖的作用，但杀伤作用与蜂毒素标准品比较降低明显，M1-M4的抗肝癌作用分别降低了约8倍、10倍、4倍，差异有统计学意义(P<0.05)。 结论：本实验改造了四种蜂毒素类似物M1-M4，发现均可以明显降低溶血作用，且蜂毒素类似物对于三种人肝癌细胞BEL-7402、HepG2、SMMC-7721有不同程度的抑制作用，但其抑制作用较蜂毒素标准品降低明显，这可能与改变蜂毒素氨基酸序列，不同程度地破坏了原有的蜂毒素空间构象，导致抗肝癌作用下降有关。