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目的:肺癌是我国发病率最高的癌症,其死亡率无论在城市还是农村均位居第一。肺癌的病理类型很多,但80-85%的病理类型为非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer,NSCLC）,非小细胞肺癌又包括肺鳞癌、肺腺癌、大细胞肺癌及其他少见的分型。环状RNA（Circular RNA,Circ RNAs）属于非编码RNA,是闭合环状的结构,具有稳定性、特异性、保守性、广泛性的特点,并在人体组织、细胞、体液中广泛存在,是目前肺癌早诊早治的研究热点肿瘤标志物。本研究通过对非小细胞肺癌组织及癌旁组织高通量测序,选取目标差异表达环状RNA,进一步在组织及血液样本中验证表达差异,以期找到可鉴别肺小结节良、恶性、新的敏感性及特异性较佳的潜在生物标志物,并分析环状RNA与NSCLC患者临床特征的相关性。方法:1.研究选取2021年1月至2021年9月就诊于赣南医学院第一附属医院胸外科,并行肺部切除术NSCLC患者组织及血液标本。按照排除及纳入条件收集标本,共18例NSCLC患者癌组织及癌旁组织纳入研究。选取NSCLC组患者外周血标本60例（2-4ml/例）,按结节直径大小分组,分为肺结节组（d≦3cm）43例,肺肿物组（d＞3cm）17例。选取肺部良性肿物患者外周血标本23例,收集就诊于体检中心的健康志愿者外周血标本37例,志愿者均行胸部CT检查,排除肺部疾病。2.选3对癌组织及癌旁组织,采用第二代测序技术（Next-Generation Sequencing,NGS）高通量测序,筛选表达差异显著hsa＿circ＿0005004作为目标研究基因。在15对癌组织及癌旁组织中使用实时荧光定量PCR（Real-Time Quantitative Reverse Transcription PCR,q RT-PCR）验证hsa＿circ＿0005004表达情况。进一步对肺结节组（d≦3cm）,肺肿物组（d＞3cm）及良性肿物患者、健康志愿者外周血标本使用q RT-PCR（实时荧光定量）验证hsa＿circ＿0005004表达情况。3.通过构建受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve,ROC曲线）评估hsa＿circ＿0005004在NSCLC的诊断价值。正态分布数据采用两独立样本t检验分析癌组织及癌旁组织hsa＿circ＿0005004表达差异性,多样本偏态数据采用秩和检验分析NSCLC组、良性肿物组、健康志愿者组中hsa＿circ＿0005004表达差异。秩和检验用于评估NSCLC患者hsa＿circ＿0005004表达水平与患者临床特征之间的关系。结果:1.采用第二代测序技术（Next-Generation Sequencing,NGS）对3对癌组织及癌旁组织高通量测序,结果共17例环状RNA表达上调,18例表达下调。在表达差异明显的环状RNA中,选择表达下调的hsa＿circ＿0005004,在15对NSCLC癌组织、癌旁组织中验证,结果显示hsa＿circ＿0005004在组织样本验证中同样表达下调,差异有统计学意义。对NSCLC组、良性肿物组、健康志愿者组外周血标本中hsa＿circ＿0005004表达水平检测,hsa＿circ＿0005004在NSCLC患者血浆表达水平较良性肿物组（p=0.015）及健康志愿者组降低（p＜0.01）。hsa＿circ＿0005004在良性肿物组及健康志愿者间表达水平差异无统计学意义（p=0.148）。环状hsa＿circ＿0005004在肺结节组中表达水平与肺肿物组相比差异无统计学意义（p=0.7414）。2.hsa＿circ＿0005004与NSCLC患者年龄（p=0.9736）、吸烟史（p＞0.999）、性别（p=0.2683）、TNM分期（p=0.6538）、淋巴结转移（p=0.6450）、肿瘤直径大小（p=0.7414）无关,与患者CEA（carcinoembryonic antigen）有关（p=0.017）。构建ROC曲线,hsa＿circ＿0005004对NSCLC患者有诊断价值,ROC曲线下面积（AUC=0.837 95%CI 0.749-0.925）,敏感度=0.917,特异度=0.676。hsa＿circ＿0005004诊断截断值为0.2650。hsa＿circ＿0005004对肺结节患者有较好的良恶性诊断价值,ROC曲线下面积（Area Under Curve,AUC=0.764 95%CI0.628-0.901 p＜0.01）,诊断截断值为0.2700。结论:1.Hsa＿circ＿0005004在癌组织表达水平低于癌旁组织（p=0.038）;2.Hsa＿circ＿0005004在NSCLC患者血浆中表达水平低于良性肿物（p=0.015）及健康体检人血浆中表达水平（p＜0.01）,可作为肺癌的诊断生物标志物,对肺结节良恶性的诊断有一定价值;3.Hsa＿circ＿0005004在NSCLC患者表达水平与CEA有关（p=0.0.017）。