萎缩糜烂型口腔扁平苔藓白色念珠菌基因分型和药敏研究

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目的:研究萎缩糜烂型口腔扁平苔藓(oral lichen planus, OLP)患者中白色念珠菌的检出率,并对白色念珠菌分离株进行基因分型和药敏研究,以期从基因水平为临床治疗萎缩糜烂型OLP患者伴发的白色念珠菌感染合理选用抗真菌药物提供依据。方法:1.选取185例萎缩糜烂型OLP患者(男78例,女107例)及120例健康对照者(男54例,女66例)为研究对象。采用改良棉拭子法取样后,以科玛嘉念珠菌显色培养基和聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)技术对白色念珠菌进行分离鉴定。2.采用PCR方法,针对白色念珠菌25S rDNA中的一段可转移内含子设计引物,对两组中的白色念珠菌分离株进行基因分型。3.根据美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI)推荐的微量稀释法参考方案(M27-A3)测定白色念珠菌不同基因型对四种临床常用抗真菌药物敏感性。结果:1.两组研究对象的资料均衡性较好,具有可比性。经分离鉴定,萎缩糜烂型OLP组白色念珠菌检出率为54.6%,高于健康对照组的30.8%,差异存在显著性(P<0.05)。科玛嘉念珠菌显色培养基和PCR技术鉴定白色念珠菌的符合率为100%。2.萎缩糜烂型OLP组白色念珠菌共检出A、B、C三种基因型,各基因型所占比例分别为38.6%、16.8%、44.6%,以A、C型为主;健康对照组白色念珠菌也检出A、B、C三种基因型,各基因型所占比例分别为91.9%、5.4%、2.7%,以A型占绝大多数。两组中白色念珠菌基因型构成存在显著性差异(P<0.05)。3.B型未出现5-氟胞嘧啶耐药株,A型对5-氟胞嘧啶耐药率显著高于B、C型(P<0.05);B型对氟康唑耐药率显著高于A型(P<O.05),C型对氟康唑耐药率有高于A型的趋势,但无显著性差异(P>0.05);C型对伊曲康唑耐药率显著高于A型(P<0.05),B型对伊曲康唑耐药率有高于A型的趋势,但无显著性差异(P>0.05);B、C型均未出现制霉菌素耐药株,A、B、C型对制霉菌素耐药率无显著性差异(P>0.05)。结论:1.萎缩糜烂型OLP组白色念珠菌检出率显著高于健康对照组,说明与健康人相比,萎缩糜烂型OLP患者口腔微环境发生改变,使得白色念珠菌易于粘附定植于萎缩糜烂型OLP患者口腔黏膜并大量繁殖。2.萎缩糜烂型OLP组白色念珠菌基因型呈现多态性,与健康对照组相比,白色念珠菌主要基因型发生变化。萎缩糜烂型OLP组与健康对照组白色念珠菌基因型构成存在显著性差异,提示萎缩糜烂型OLP患者伴发的白色念珠菌感染可能为外源性感染。3.萎缩糜烂型OLP白色念珠菌不同基因型对抗真菌药物的耐药性有差异。治疗时应根据基因分型和药敏试验结果合理选用抗真菌药物,以缩短疗程,提高疗效。萎缩糜烂型OLP白色念珠菌的所有基因型对制霉菌素几乎都没有耐药性,其临床应用价值应引起充分重视。
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