【摘 要】
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山核桃在生长过程中,存在童期漫长,雄花每年消耗大量的树体营养,严重影响果实的产量。已有研究表明AGAMOUS-LIKE24(AGL24)是调控植物花器官发育的重要转录因子,但在山核桃中如何发挥功能还有待进一步研究。我们期望通过生物信息学以及分子生物学技术对该基因进行功能研究,从而可以有效缩短山核桃童期,并为山核桃的花发育的调控机理研究奠定一定的基础,取得如下研究结果:(1)CcAGL24存在两个同
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山核桃在生长过程中,存在童期漫长,雄花每年消耗大量的树体营养,严重影响果实的产量。已有研究表明AGAMOUS-LIKE24(AGL24)是调控植物花器官发育的重要转录因子,但在山核桃中如何发挥功能还有待进一步研究。我们期望通过生物信息学以及分子生物学技术对该基因进行功能研究,从而可以有效缩短山核桃童期,并为山核桃的花发育的调控机理研究奠定一定的基础,取得如下研究结果:(1)CcAGL24存在两个同源基因,分别为CcAGL24a和CcAGL24b。它们都含有M、I、K、C四个蛋白结构域,是典型的MADS-box基因。(2)qRT-PCR检测结果显示,CcAGL24a和CcAGL24b时空表达存在差异,CcAGL24a和CcAGL24b主要在山核桃的花器官中表达,并且该基因在雌花雌蕊原基形成期时表达量较高。(3)CcAGL24a与CcAGL24b可能在调控成花方面功能存在冗余,都具有使植物花期提前的作用,植株的花瓣萼片化。但它们功能又存在差异,其中CcAGL24a的过表达植株心皮变短变粗,CcAGL24b的过表达植株中出现心皮变长、萼片变大且呈凹陷状态。这也表明CcAGL24a与CcAGL24b可能在调控成花方面功能存在冗余,都出现早花表型,但在花器官形成功能存在差异。(4)亚细胞定位发现,CcAGL24a和CcAGL24b在原生质体的细胞核中观察到绿色荧光,表明该基因的蛋白定位在细胞核上,从而行使其功能。(5)蛋白互作研究发现,CcAGL24a与CcAGL24a、CcAP1存在蛋白体外互作,且蛋白之间的互作强弱存在一定的差异,其中CcAGL24a与CcAP1蛋白互作程度最强。而CcAGL24b不与其他基因存在蛋白体外互作。(6)启动子分析发现,CcAGL24启动子中存在多种顺式应答元件,其中包括光响应、低温响应以及赤霉素响应等相关应答元件,但光响应元件的数量较多。这可能是CcAGL24基因受到光照对花器官影响的因素较大。
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