【摘 要】
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该研究包括以下五部分:第一部分,视网膜光感受器细胞纯化方法的研究.目的:探讨改进获取纯视网膜光感受器细胞的方法.结论:改良的准许分子激光切削法和酶分层消化法均能获取纯
【出 处】
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中山医科大学 中山大学中山医学院 中山大学
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该研究包括以下五部分:第一部分,视网膜光感受器细胞纯化方法的研究.目的:探讨改进获取纯视网膜光感受器细胞的方法.结论:改良的准许分子激光切削法和酶分层消化法均能获取纯视网膜光感受器细胞,且对细胞损伤小,可为视网膜光感受器细胞的研究创造条件.第二部分,视网膜光感受器细胞的体外培养体系的探讨.一、SD新生鼠视网膜光感受器细胞的培养;目的;探讨SD新生鼠视网膜光感受器细胞体外培养体系.结论:使用50﹪视网膜神经胶质细胞的条件培养液利于视网膜光感受器细胞的体外培养和存活,为视网膜光感受器细胞的各种体外研究提供细胞来源.二、人胚眼视网膜光感受器细胞的培养.目的:探讨人胚眼视网膜光感受器细胞的获取和体外培养方法.结论:酶分层消化法所获取的人胚眼纯视网膜光感受器细胞能在体外较长时间存活,并表达光感受器细胞特异性视紫质蛋白,为人视网膜光感受器细胞的研究和移植创造条件.第三部分,rAd-gfp-bcl-X<,L>重组腺病毒的制备.目的:制备含抗凋亡基因bcl-X<,L>的重组腺病毒.结论:用细菌内同源重组法可以高效、简便、快捷地制备出重组腺病毒载体,重组腺病毒经293细胞包装、扩增和氯化铯纯化后可制备出高滴度的rAd-gfp-bcl-X<,L>.第四部分,bcl-X<,L>抗视网膜光感受器细胞凋亡作用的体外研究.目的:采用体外培养视网膜光感受器细胞的谷氨酸损伤模型,评价抗凋亡基因bcl-X<,L>对视网膜光感受器细胞的抗凋亡作用,并比较脂质体、重组腺病毒转染法的转染率.结论:在视网膜光感受器细胞的基因转染中,腺病毒毒介志的转染率明显高过脂质体法,重组腺病毒是视网膜变性性疾病基因治疗的较理想的载体.重组腺病毒介导转染的bcl-X<,L>对体外培养的谷氨酸损伤的视网膜光感受器细胞有抗凋亡作用.第五部分:rAd-gfp-bcl-X<,L>治疗视网膜变性鼠的初步研究.一、经外路的视网膜下腔移植术;目的:建立简易、安全、有效的经外路的视网膜下腔移植方法.结论;所用经巩膜的外路特殊显微注射法是较理想的视网膜下腔移植方法,可满足视网膜变性性疾病手术治疗的需要.二、视网膜下腔注射rAd-gfp-bcl-X<,L>治疗视网膜变性鼠.目的:初步观察rAd-gfp-bcl-X<,L>治疗视网膜变性鼠的疗效.结论:注射至早期的视网膜变性鼠视网膜下腔中的rAd-gfp-bcl-X<,L>能有效地转染光感受器细胞,并表达、发挥抗凋亡的作用.
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