【摘 要】
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哺乳动物核移植技术在基础理论研究及应用研究中具有非常重要的意义,该研究涉及到核移植两个重要的领域,即异种核移植及同种体细胞核移植.在第一方面的研究中,利用连续核移植
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哺乳动物核移植技术在基础理论研究及应用研究中具有非常重要的意义,该研究涉及到核移植两个重要的领域,即异种核移植及同种体细胞核移植.在第一方面的研究中,利用连续核移植的方法探讨如何提高异种重构胚的体外发育率,同时对核移植的一些基础理论问题进行了研究.在第二方面的研究中,体外培养了两头高产优质牛的耳朵成纤维细胞,用它们作为供体进行核移植探讨成年体细胞在卵胞质中是否能够去分化、恢复全能性、并最终发育成个体.在异种连续核移植中,首先对电刺激诱导小鼠及兔卵母细胞孤雌活化进行了研究,用大熊猫-兔异种重构胚的卵裂球作为供核进行连续核移植可以显著提高重构胚发育率,连续三次核移植分别获得了19.4﹪、13.5﹪和10.3﹪的囊胚发育率（显著高于体细胞核移植组,P<0.05）.当用电刺激方法降低兔卵母细胞中成熟促进因子（MPF）活性后用作连续核移植受体,获得了30.6﹪的囊胚发育率,显著高于高活性MPF组（3.3﹪）和MPF正在降低组（12.1﹪）.这些结果说明,连续移植可以提高大熊猫-兔异种重构的囊胚发育率,而在降低卵胞质中MPF活性后又可以进一步改善重构胚的发育率.在同种体细胞克隆牛研究中,共获得了14头克隆牛,其中9头在出生前后死亡,5头存活至今,所有克隆个体经微卫星分析证明其核DNA均与供体细胞一致,而与受体母牛无关.这是中国首批克隆牛群体,包括雌性的克隆荷斯坦奶牛个体及雄性的克隆盖普威（黄牛）个体.在研究中,采用挤压法去核提高了去核的准确性,同时减少了对卵母细胞的损伤.通过比较来自雄性及雌性的耳成纤维细胞的重构胚发育率发现,两者早期的发育率无显著差异,移植后的妊娠率也无差异,但雄性重构胚发育到期的比例却明显低于雌性重构胚（1.82﹪和8.02﹪）.
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