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本文对H5N1 NS1蛋白Met-101在核蛋白亚细胞定位及抗I型IFN中的作用进行了研究。A型流感病毒NS1蛋白(NS1A)主要通过以下两种途径拮抗Ⅰ型干扰素生成：与TRIM25和RIG-Ⅰ结合从而抑制RIG-Ⅰ介导的I型干扰素信号通路向下游传导，以及与CPSF30相互作用抑制宿主pre-mRNA(包括IFN pre-mRNA)的剪切加工。本论文发现，与influenza A/PR/8/34(PR8)NS1相比，H5N1 NS1抑制IFN-β启动子的能力较弱，并且抑制IFN-β生成的分子机制也截然不同，具体表现在以下几个方面：H5N1 NS1定位于转染细胞的细胞核内，它与CPSF30有较强的亲和力，从整体上抑制宿主蛋白的表达水平，但不影响由RIG-Ⅰ介导的Ⅰ型干扰素信号通路。然而当H5N1NS1蛋白第101位的蛋氨酸(methionine，Met)突变成异亮氨酸(isoleucine，Ile)后(此突变体命名为H5-101)，上述功能完全发生了改变。部分H5-101蛋白开始向细胞质迁移，余下的定位于细胞核的蛋白也不再均匀地分布于整个细胞核(除核仁外)，而是向细胞核膜一侧聚集；除此之外，H5-101与CPSF30的亲和力明显降低，而与RIG-Ⅰ产生了较强的相互作用，并通过与RIG-Ⅰ结合抑制了IRF3入核，增强了拮抗Ⅰ型干扰素生成的能力。本文证明，之前报道的核输出信号NES(138-147aa)并不能介导H5N1 NS1的出核，这说明H5N1编码的其它氨基酸可能发挥着NES的功能。近些年来，越来越多的从人分离到的流感病毒NS1A蛋白在第101或106位点编码蛋氨酸，并且许多实验证明该蛋氨酸不仅在维持NS1-CPSF30复合物稳定性方面发挥着重要作用，而且与重组病毒空斑的大小有关，这些都说明Met-101在A型流感病毒生活周期中扮演了重要的角色。本论文的实验结果证明，Met-101不仅影响NS1-CPSF30复合物的形成，同时还决定了H5N1是否与RIG-Ⅰ相互作用。我们推测，第101位点的蛋氨酸(methionine，Met)突变成异亮氨酸(isoleucine，Ile)后，与其邻近的第100位的亮氨酸(Leu-100)协同作用，增强了突变体H5-101蛋白的出核，形成了一个潜在的与蛋白出核有关的区域。本论文揭示了Met-101在A型流感病毒生活周期中的一些重要作用，为进一步了解A型流感病毒致病机理以及抗病毒药物的筛选提供了有价值的信息。