紫外线致弱鸡柔嫩艾美耳球虫及其减毒株的生物学特性研究

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弱毒苗是应用最为广泛的球虫疫苗,球虫卵囊致弱的方法主要是对球虫卵囊进行冷却、加热、超声、离子辐射等处理,而使之减毒。本试验对鸡E. tenella YL株的母株进行不连续紫外线照射致弱,分离纯化后得到减毒株并对其生物学特性进行了研究,为球虫弱毒苗的研制奠定基础。试验结果如下:1.用波长2650 ?紫外线对柔嫩艾美耳球虫杨凌株卵囊不连续照射,时间分别为10 min,20 min,30 min,40 min,50 min和60 min,相对孢子化率分别为94.39%,81.63%,72.96%,53.06%,21.94%和8.16%,说明UV作用10 min对卵囊活力影响不大,随照射时间的延长,卵囊的相对孢子化率明显下降,长时间的UV照射对卵囊的发育影响显著(P<0.05)。采用的UV进行不连续照射球虫卵囊,时间控制在30 min左右为宜。2.照射后的卵囊经过培养后观察孢子囊清晰可见,囊壁内有8个子孢子位于4个孢子囊内。通过测定相对增重率,存活率,病变值及克粪便卵囊数(OPG),在照射30~40 min的情况下,相对增重率在70%左右,OPG也维持在较高水平。3.用单卵囊繁殖的鸡E. tenella YL减毒株孢子化卵囊经口服感染鸡,用饱和食盐水漂浮法能够收集得到球虫孢子化卵囊,杂质少,形态完整,减毒株卵囊的大小为19.8~21.2×15.5~16.6μm。4.E. tenella YL减毒株和母株的潜隐期分别为159 h和168 h,减毒株的潜隐期比母株的缩短了9 h,但差异不显著。5.随着感染剂量的增加,减毒株单卵囊的繁殖指数分别为2560、1035和567,而母株的分别为2630、1128和708。单卵囊繁殖能力与感染剂量成负相关;同时在同等剂量感染的条件下,说明减毒株的繁殖能力与母株相比有所减弱。6.用感染剂量分别为1×103、5×103、10×103个卵囊/羽的E. tenella YL减毒株感染雏鸡后第6 d,各组的相对增重率分别为对照组的82.4%,56.2%和48.5%,从增重结果可以看出,各球虫卵囊感染组鸡只的平均增重都不同程度地低于对照组。在同一剂量感染条件下,减毒株试验组与母株试验组间的盲肠病变记分存在差异,说明减毒株卵囊的致病性与母株相比有所减弱。
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