Cyclin X基因克隆及功能初探

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细胞周期蛋白是调节细胞周期进程的一类重要蛋白质,通过与周期蛋白依赖性蛋白激酶(cyclin dependent kinase,CDK)结合而调节细胞周期进程,具有种属特异性和组织特异性。我们实验室通过EST同源筛选的方法,在GenBank数据库中发现了一个新的包含cyclin box的基因,在人的睾丸组织cDNA文库中将其克隆,该cDNA序列包含863个碱基的开放阅读框,编码一个287个氨基酸的蛋白质。我们把该序列命名为Cyclin X。组织表达谱分析表明Cyclin X在睾丸组织中高度表达,在心脏,肝脏和肺里中度表达。 为了研究Cyclin X的生理功能,我们选择以酵母双杂交的方法筛选互作蛋白为切入点,从人的睾丸cDNA文库中筛选到一个能与Cyclin X互作的蛋白——蛋白激酶C的受体RACK1。体外GST-pull down实验和荧光共定位实验表明Cyclin X能与RACK1相互作用。流式细胞仪对过表达Cyclin X的HEK 293T细胞内DNA含量的分析表明转染pCMV-myc-Cyclin X质粒的细胞S期长度明显增加。Cyclin X在肝癌组织中上调表达。这些结果提示Cyclin X可能是通过与RACK1相互作用参与调控Rb活性,引导细胞周期由S期向G2期转变。
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