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目的:1.寻找罹患孤独症谱系障碍(Autism spectrum disorder,ASD)并发智力障碍的致病基因,探索ASD伴发智力障碍的发生机理。2.探寻与ASD发生相关的细胞因子及其致病机制。方法:1.全外显子组测序探索ASD的易感基因:(1)对研究对象进行体格检查、神经检查及精神评估等;(2)抽取ASD患者的外周血;(3)提取外周血全基因组DNA;(4)对外周血全基因组DNA进行高通量测序,测序结果用Sanger测序予以验证。2.通过Milliplex多因子检测技术寻找与ASD发病有关的细胞因子:(1)收集研究对象的临床资料(包括一般资料、孤独症行为评定量表、修正的婴幼儿孤独症筛查量表等);(2)抽取ASD患者和对照组的外周血;(3)应用Milliplex多因子检测技术,测定ASD患者和对照组血清中的11种与辅助性T细胞17(Th17)、辅助性T细胞1(Th1)、辅助性T细胞2(Th2)等有关的细胞因子的浓度;(4)提取外周血RNA进行实时定量PCR(RT-PCR)实验,检测TNF-α和hnRNPL免疫调节相关的长非编码RNA(TNF-αand hnRNPL related immunoregulatory LincRNA,THRIL)的表达。结果:1.高通量全外显子组测序发现3个候选基因,包括DIAPH3、SETD2、RELN,并通过Sanger测序进行验证,其中RELN基因发现为同义突变;DIAPH3基因的突变点位于第18外显子c.2156T>C(p.I719T),且发生在富含脯氨酸的FH2保守结构域,是一个错义突变,其父母Sanger测序结果未发现该突变,考虑为新发突变;SETD2基因的突变c.6895G>A(p.G2299R)也被确认为新发的错义突变。2.应用Milliplex多因子检测技术对11个细胞因子进行测定发现:(1)肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-17A(IL-17A)在ASD患者外周血中的表达显著增加(P<0.05);(2)TNF-α的表达与孤独症行为评定量表(ABC量表)的五个临床症状维度的严重程度呈正相关;(3)THRIL在ASD患者体内的表达明显减少(P<0.01)。结论:1.SETD2和DIAPH3基因的突变可能与孤独症谱系障碍并发智力障碍的发生和发展有关。2.IL-1β、IL-17A和TNF-α在ASD患者体内的表达明显增加,可能增加ASD的发病风险。3.TNF-α在ASD患者体内的表达明显升高,且与临床症状的严重程度呈正相关。TNF-α有望成为ASD患者的一个生物标记物,为ASD的诊断及治疗提供新的指标和方向。