论文部分内容阅读
在很大程度上，细胞分化是由转录因子调节的。人们已经鉴定了几个大的转录因子家族。在哺乳动物中，锌指蛋白可能是最庞大的家族。锌指蛋白结构域主要由组氨酸和半胱氨酸组成，它们结合一个锌离子，环化后组成其二级结构。本文利用kruppel型(cys2／His2型)以及RING型锌指基因顺序上的保守特征，设计简并引物从人类早期胚胎cDNA文库中初步筛选克隆出三个krupple型锌指蛋白新基因，经国际基因命名委员会批准命名为DTX2A、ZVF480、 ZNF323，其中DTX2A基因全长2781个碱基，含有11个外显子，全基因在基因组序列上长达44kb，Deletx2A编码一种包含一个WWE区域与一个RING锌指区域，Northern结果显示Deletx2A在成人的骨骼肌、心脏有高表达，在胰腺，胎盘与肝脏中表达较弱，在胚胎心脏中也有表达，提示该基因可能与心脏发育有关。ZNF48基因全长4732个碱基，开放阅读框长1551个碱基，编码一个KRAB框和12个C2H2型锌指，Northern结果显示ZNF480在六月胚胎中只在心脏中有表达，而成人的心脏、胰腺有较强的表达，在骨骼肌、肾脏、肝脏、胎盘有弱表达，ZNF480的过表达激活转录因子AP-1与SRE的活性，这两种因子是MAPK信号途径介导的重要因子，这说明ZNF480蛋白可能在MAPK信号途径中作为激活因子介导细胞功能。ZNF323基因全长3179个碱基，含8个外显子，定位于6p22.1一22.3，在基因组DNA上长29.45Kb，其编码蛋白质全长406个氨基酸，含有1个SCAN框和6个krupple型锌指。Northern Blot分析表明Z样召23基因在人类早期胚胎不同时期(18一25周)表达水平不同，在肺，肾和肝脏的表达水平较强，其它组织表达较弱。在成体组织的肝和肾脏中的表达较强，在肺、胰腺、脑、肌肉、心脏等组织中的表达较弱。综合这些基因的结构和表达特征，我们可以初步得出一个结论:它们编码的是参与多种人类胚胎器官发生的锌指转录调控因子。此外我们还收集人类药物流产的早期胚胎，观察发现胚胎畸形占17.860k，早期致死占32.54%;采用组织切片技术将胚胎制成一系列石蜡连续切片，染色后显微观察畸形和正常的早期胚胎内部心脏等器官的发育情况，发现胚胎外部畸形与体内畸形存在一定关联，对此我们将做进一步的研究。