同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞迁移的影响及其分子机制的探究

来源 :安徽医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tianhaiyandml
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:研究同型半胱氨酸(Hcy)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)迁移能力的影响,并探讨其作用是否与MAPK通路调控肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的表达有关。  方法:使用不同浓度的Hcy处理人脐静脉内皮细胞后,倒置显微镜观察细胞形态学变化;MTT法检测Hcy对HUVECs增殖能力的影响;划痕法检测Hcy单独以及联合MLCK抑制剂ML-7、p38通路抑制剂SB、p-ERK通路抑制剂PD、MAPK通路激活剂PMA用药后对 HUVECs迁移的影响;免疫组化以及免疫荧光法检测Hcy对MLCK表达的影响;Western blot法检测不同浓度Hcy对MLCK、MLC磷酸化水平、occludin、CAV-1以及MAPK信号通路相关蛋白表达的影响,同时,检测Hcy联合ML-7、SB、PD、PMA用药后对MLCK和MLC磷酸化表达的影响。  结果:倒置显微镜观察细胞形态后发现Hcy处理后细胞形态不规则,多触角且生长速度降低,MTT结果显示Hcy对HUVECs的增殖有明显的抑制作用,抑制效果呈浓度依赖性。划痕实验显示,Hcy单独及联合MAPK通路激活剂PMA均可促进HUVECs的迁移,而加入抑制剂SB、PD和ML-7后HUVECs的迁移率降低。免疫组化分析表明MLCK的表达量随着Hcy浓度的增加而升高,免疫荧光同样表明Hcy可以增强MLCK的表达。Western blot结果显示Hcy可显著下调occludin的表达,上调MLCK、CAV-1的表达以及MLC、p38、ERK磷酸化水平,加入ML-7、SB、PD后MLCK的表达量及MLC的磷酸化水平明显下降,而MAPK通路激活剂PMA可显著上调MLCK的表达量及MLC的磷酸化水平。  结论:Hcy对HUVECs的迁移具有显著的促进作用,其可能的分子机制是Hcy通过P38/MAPK以及ERK/MAPK通路上调MLCK的表达以及MLC的磷酸化水平。
其他文献
本文首先介绍了搜索引擎的基本概念,搜索引擎的发展历史及目前搜索引擎的分类,分析了未来搜索引擎的发展现状和趋势,并对搜索引擎的工作原理及相关技术做了比较详细的阐述。
随着GPS技术发展日益成熟,GPS导航定位技术不但在民用上得到广泛的应用,而且在国防军事现代化建设中也凸显了尤为重要的作用。它可以应用于各种作战平台的监控,精确制导和打击,军
土壤低磷是制约作物产量和质量的重要因素之一,虽然施用磷肥能够改善作物磷营养状况,但是由于磷肥利用效率低下和磷资源的不可再生性,仅依赖施用磷肥并非长久之计,因此培育耐低磷
合成孔径雷达(SAR)的常规成像模式(如条带模式和聚束模式)不能同时兼顾高分辨率与大测绘面积,而滑动聚束模式是一种新颖的介于条带模式和聚束模式之间的SAR工作模式。它通过控
快速的生活节奏,让自热火锅成了许多人,特别是孤独进餐者的“小确幸”.自热火锅里的食材均为独立包装,可以避免食材之间相互串味.自热火锅不用炊具、餐具、火锅底料,比传统意
期刊
我自从做了家庭“煮夫”,就对烹饪的技术与窍门有了浓厚的兴趣,偶然间看到一则“炒菜放盐早晚有讲究”的小视频,颇有启发.当我细品做菜放盐的时机,竟也悟出一点做人的道理来.
期刊
它曾因生态环境的恶化几近灭绝,又因生态环境的改善得以重生.它是传说中的吉祥之鸟,也是秦岭山中的“四宝”之一.它就是被誉为“东方宝石”的稀世珍禽——朱鹮.陕西是朱鹮的
期刊
近几天,我家楼下常见一辆装满荸荠的自行车倚在洒满阳光的墙根下.一个外地来的小伙子,操着陌生的口音叫卖荸荠.
期刊
婴儿是月龄为0~6个月的孩子,较大婴儿的月龄是6~12月,幼儿是指12~36月龄的孩子.对于婴幼儿来说,父母们最关心的莫过于他们的饮食和睡眠了.古人云:“病从口入.”这句话如果从微生
期刊
随着Internet的快速发展,Web服务的应用越来越广泛。与此同时,针对Web服务器的攻击也越来越多,为了应对日益严峻的Web安全问题,市场上出现了专门针对Web服务器的防御产品-Web应用