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目的：观察黄芪注射液(AMI)对正常犬肾小管细胞增殖的影响；急性缺血再灌流(IR)肾损伤性兔血清对小管细胞的损伤作用；AMI对经IR肾损伤性兔血清(SIR)处理后的小管细胞增殖的影响，并探讨其机制。
方法：1.IR肾损伤性兔血清和对照兔血清(SC)的制备用健康家兔16只，随机均分为对照和IR组，IR组作双肾动脉夹闭1小时再灌流2小时；对照组仅模拟手术过程，不夹闭肾动脉。分别提取制备急性SIR和SC。2.培养肾小管细胞增殖活性的测定用MTT法测定肾小管细胞株的OD值以判断其增殖活性。绘制小管细胞的生长曲线，确定细胞接种浓度和观察时间；通过不同血清和不同浓度的AMI引起的小管细胞增殖活性的改变，确定血清和AMI的用量。3.AMI对培养肾小管细胞增殖的作用及机制研究实验分5组，每组n=8。对照组：1640培养基加小牛血清(FCS)；SC组：1640培养基加SC；SIR组：1640培养基加SIR；AMI组：1640培养基加AMI(终浓度为5mg/ml)；SIR+AMI组：1640培养基加SIR和AMI(终浓度为5mg/ml)，以上各组血清终浓度均为10％，同2×105/ml的肾小管细胞共培养44小时时，进行生物学检测。4.检测指标判定各组细胞的增殖状况、培养液中LDH含量、细胞中的PCNA和EGF阳性表达的情况。5.统计学处理实验数据以均数加减标准差(X±S)表示，进行单因素方差分析，组间均值比较采用t检验，样本率的比较用x2检验，p＜0.05示差异有显著性。
结果1.不同性质和浓度的血清对肾小管细胞增殖的作用用不同性质和浓度的血清处理后的肾小管的增殖能力(OD值)分别为：10％FCS(1.28775±0.1161)、15％SIR(0.538±0.094)、5％SC(0.6745±0.0533)、10％SC(0.56025±0.0954)、15％SC(0.47875±0.0892)、无血清1640培养基(0.4105±0.0922)、5％SIR(0.192±0.0826)和10％SIR(0.123±0.0362)。按增殖程度的大小，可分为四个等级：10％FCS最大，15％SIR、5％SC和10％SC四组中测得的OD值次之，15％SC和无血清1640培养基两组的OD值较小，5％SIR和10％SIR二组的OD值最小，四个等级之间比较差异均具有显著性，而各自内部差异则无显著性。2.不同浓度的AMI对对照状态下生长的肾小管细胞增殖的作用当AMI浓度在0.25-4.9mg/ml范围内时，AMI对肾小管细胞均有促增殖作用，但与对照组(0D值：0.8088±0.1291)比较，差异不具有显著性；当浓度在5-100mg/ml范围内时(AMI浓度为5mg/ml、10mg/ml、25mg/ml、50mg/ml和100mg/ml时各组的OD值分别为1.0618±0.1224、1.0707±0.1428、1.0807±0.0843、1.1085±0.1605和1.0865±0.1618)，与对照组比较差异均具有显著性，但各浓度组之间比较，差异不具有显著性。3.AMI对经SIR处理的肾小管细胞增殖的影响在AMI浓度为5mg/ml时，各组细胞的增值能力分别为：AMI组(1.0718±0.1224)、AMI+SIR组(0.4991±0.0689)、对照组(1.2264±0.2814)、SC组(0.5912±0.0593)和SIR组(0.1751±0.0662)。AMI组、AMI+SIR组、对照组和SC组的小管细胞增殖能力均较SIR组要强，差异均具有显著性。对照组和AMI组之间，SC和AMI+SIR组之间差异无显著性，AMI+SIR组和SIR组之间差异具有显著性。细胞内LDH活力分别为：SIR组(2068.625±123.32)、对照组(1427.375±218.4)、AMI组(1448.75±249.96)、SC组(1847.75±104.44)和AMI+SIR组(1835.875±197.7)。SIR组的LDH活力较其余四组高，差异具有显著性；对照组和AMI组之间，SC和AMI+SIR组之间差异无显著性，AMI+SIR组和SIR组之间差异具有显著性。各组细胞中PCNA阳性率的表达：AMI组(43.30±3.95)、AMI+SIR组(24.59±4.42)、对照组(47.20±5.25)、SC组(28.06±3.75)和SIR组(16.65±2.37)。AMI组、AMI+SIR组、对照组和SC组的小管细胞PCNA的阳性率均较SIR组高，差异具有显著性。对照组和AMI组之间，SC和AMI+SIR组之间差异无显著性；AMI+SIR组和SIR组间差异具有显著性。各组细胞中EGF阳性率的表达：AMI组(38.77±2.56)、AMI+SIR组(23.39±3.91)、对照组(44.38±2.78)、SC组(26.75±3.73)和SIR组(17.48±2.81)。AMI组、AMI+SIR组、对照组和SC组的小管细胞EGF的阳性率均较SIR组高，差异具有显著性。SC和AMI+SIR组之间比较差异无显著性；对照组和AMI组间、AMI+SIR组和SIR组间差异具有显著性。
结论：黄芪注射液具有促进犬肾小管细胞增殖和减轻急性缺血再灌流肾损伤性兔血清致肾小管细胞损伤的作用，其机制可能同保护线粒体功能、改善能量代谢，维持细胞膜的稳定性，提高细胞表皮生长因子的表达，增强小管细胞的增殖能力等作用有关。