增液润燥汤对原发性干燥综合征模型小鼠TNF-α、IL-6、IgG影响的相关研究

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目的:探索增液润燥汤治疗干燥综合征(Sjogren’ssyndrome,SS)的机理。通过研究其对SS模型小鼠饮水量,胸腺、脾脏指数及颌下腺TNF-α、IL-6,血清IgG指标的影响,初步研究增液润燥汤治疗SS的机制,为临床治疗提供实验依据。方法:选取BALB/c小鼠,脱颈椎处死,取出两侧颌下腺,剔除包膜、淋巴结等附属物,称质量、剪碎后加生理盐水在冰浴中匀浆机匀浆,然后在4℃低温离心机中离心,弃去上层脂质,保留上清液,得到自身抗原蛋白,然后用灭菌PBS将抗原稀释成800μg/ml,再加等量弗氏完全佐剂,使抗原变为400μg/ml的油水混合乳剂。把70只BALB/c小鼠,按数字随机表法随机分为7组,分别为:正常组,佐剂组,模型组,增液润燥汤低剂量组、中剂量组、高剂量组,白芍总苷组。第0天,模型组、三组中药组及白芍总苷组小鼠每侧腹股沟酒精消毒后注射0.05ml抗原,佐剂组注射同剂量弗氏完全佐剂(CompleteFreund’sadjuvant,CFA)。第14天,模型组、三组中药组及白芍总苷组各个小鼠每侧腹股沟酒精消毒后注射0.05ml抗原加强免疫,佐剂组注射同剂量CFA。首次免疫后第2天及第7天,佐剂组、模型组、三组中药组及白芍总苷组各个小鼠腹腔注射0.05ml白百破联合疫苗,造成类似SS的颌下腺表现和症状。中药组所用增液润燥汤为颗粒剂冲泡溶液。正常组、佐剂组、模型组给予去离子水灌胃,三组中药组给予增液润燥汤灌胃,白芍总苷组给予白芍总苷溶液灌胃。60天内隔天测量饮水量,60天后处死小鼠称重胸腺、脾脏,计算重量指数,Elisa法测定颌下腺组织上清液中TNF-α、IL-6及血清中IgG含量。观察增液润燥汤对小鼠饮水量,胸腺指数、脾脏指数,颌下腺TNF-α、IL-6,血清IgG的影响。结果:增液润燥汤能减少SS模型小鼠的饮水量,减少胸腺、脾脏指数,使TNF-α、IL-6、IgG指标下降。病理研究发现,增液润燥汤能减轻小鼠颌下腺淋巴细胞浸润情况。结论:增液润燥汤可能通过调节免疫功实现减少SS模型小鼠饮水量,降低其TNF-α、IL-6、IgG指标,可能通过抑制TNF-α、IL-6的分泌,间接减少Th亚群的增殖和分化,从而抑制自身的免疫炎症反应。结合病理切片增液润燥汤能缓解SS模型小鼠颌下腺的淋巴细胞聚集浸润,修复腺泡及导管,改善腺体功能,缓解口干等临床症状。此实验为细胞因子TNF-α、IL-6在SS发病机制中起重要作用提供了依据。IgG作为病情活动指标,增液润燥汤也能有效减低SS模型小鼠血清IgG含量。
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