【摘 要】
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1.细胞培养以东方粘虫不同虫态为材料进行了胚胎细胞、血淋巴细胞、脂肪体细胞、中肠细胞和肌肉细胞的原代培养,结果如下:胚胎细胞:出现两种类型的细胞,一株经10个月原代培养
【出 处】
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西北农林科技大学 西北农林科技大学
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1.细胞培养以东方粘虫不同虫态为材料进行了胚胎细胞、血淋巴细胞、脂肪体细胞、中肠细胞和肌肉细胞的原代培养,结果如下:胚胎细胞:出现两种类型的细胞,一株经10个月原代培养,开始传代,细胞呈现卵圆形,贴壁生长,目前已经传至3代;而另一株培养4个月,出现单个胚胎细胞变长,呈梭形,5个月分裂成扇形向周围扩散,7个月,细胞束周围有小而圆亮的单个细胞。肌肉细胞:肌纤维松散,有大量的肌卫星细胞分离,成肌细胞横纹相间排列,细胞膜完整;贴壁后很多肌卫星细胞由圆形变为梭形,胞体饱满,两端尖细,呈杆状,观察到肌卫星细胞的分裂。脂肪体细胞:5d后出现气泡状并向四周蔓延,1个月后气泡逐渐消失并出现排列紧密的卵状细胞,50d细胞向四周发散,3个月后细胞铺满瓶底,开始传代,传代后生长缓慢,呈团状集聚。中肠细胞:中肠细胞发出现两种不同类型的细胞,其中柱型细胞于3个月后出现,4个月呈扇形分裂;梭型细胞于2个月后出现,随后开始分裂成簇。5个月后有单细胞从细胞簇团上游离并继续贴壁繁殖。血淋巴细胞:2个月细胞密度明显减小,少数细胞变亮,5个月个别细胞开始变粗变长;6个月细胞明显分裂显现,出现单个细胞克隆团。2.细胞毒力测定苦皮藤素IV、苦皮藤素V处理胚胎细胞24h后,观察发现细胞裂解,出现大量细胞碎片,培养基变浑浊,其对粘虫胚胎细胞的致死中浓度分别为76.42和129.3μg /mL;苦皮藤素IV、V处理后的粘虫中肠细胞在24h内逐渐减少而培养基依然保持澄清,相反杠柳提取物415#和3#可以使细胞逐渐分解而培养基同时变浑浊。六种天然生物源杀虫活性物质苦皮藤素IV、V、WML-1、WML-2、415#、3#对粘虫中肠细胞的致死中浓度分别为34.93、7.716、215.7、21.51、10.22和10.56μg /mL;对粘虫血细胞的致死中浓度都在100μg /mL以下,其致死中浓度分别为37.51、5.386、36.70、46.99、9.534和4.049μg /mL;对粘虫脂肪体细胞的致死中浓度分别为34.09、11.23、170.0、23.74、14.20和15.07μg /mL。
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