留兰香种质材料的超低温保存及遗传变异分析

• 作 者: 邵丽
• 发表日期: 2011年期
• 关键词: 留兰香 超低温保存 遗传变异

超低温保存被认为是植物种质资源长期保存最有效的方法。本文以留兰香（Mentha spicata L.）茎尖为材料,对其玻璃化超低温保存条件进行了研究,另外研究了超低温保存对留兰香材料生理生化反应、基因组稳定性以及DNA甲基化的作用。主要研究结果如下:1对留兰香茎尖玻璃化法超低温保存的程序进行了探索研究,结果表明:4℃低温锻炼3-4周,在添加2 mol·L^-1甘油的MS培养基中预培养3天,液体预处理培养室温处理20 min,PVS2 0℃脱水50 min时,成活率最高,可达60%左右。再生植株分化正常。2留兰香经超低温处理后与对照组相比丙二醛（MDA）含量显著升高,过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）活性均显著增强。上述生理生化指标说明,超低温处理影响了留兰香的正常生理生化反应,导致丙二醛积累,一些抗氧化酶活性改变。3运用扩增片段长度多态性（AFLP）技术对处理再生材料及对照组的基因组DNA进行了分析,在处理组与对照组之间未发现有差异片段。表明在超低温保存过程中没有引起保存材料基因组DNA序列的变化。4应用甲基敏感扩增多态性（MSAP）标记技术分析处理与对照组样品之间的甲基化水平情况。MSAP技术对超低温处理前后材料的甲基化情况分析表明:与对照相比,超低温处理后的再生材料均发生了甲基化状态与水平的变化,全基因组DNA胞嘧啶甲基化水平降低,另外甲基化与去甲基化分别为8.93%和12.3%。