癞葡萄皂甙的分离纯化及降血糖功效研究

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癞葡萄(Momordica. charantia Var. abbreviata Ser)属于葫芦科(Cucurbitaceae)苦瓜属,是苦瓜的变种,产于印度东部。其果实富含皂甙、多肽、活性蛋白等多种功效成分,现代药理研究证明癞葡萄具有降血糖、降血脂、抗癌、抗艾滋病、抑菌、抗氧化、增强免疫等功效。本文首先对癞葡萄干片的主要成分进行了分析,其中水分含量为10.96%,灰分5.93%,粗蛋白质14.08%,粗脂肪0.93%,总糖17.79%,总皂甙3.1%。以花旗参皂甙为标准品,建立了采用比色对癞葡萄皂甙进行定量测定的方法。通过比较,确定了在546nm下,以5%香草醛-冰乙酸溶液和高氯酸溶液为显色剂、显色时间为15min、显色温度为60°C的比色体系。对于癞葡萄皂甙的定性检测,采用了薄层层析法,选用正丁醇-乙酸-水(7:3:1.5)为展开剂。通过单因素实验和中心组合实验,探讨了超声波处理对提高癞葡萄皂甙得率的影响。确定超声波法提取癞葡萄皂甙的最佳工艺为:提取温度为50°C,提取时间为68.8min,乙醇浓度为75.2%,料液比为1:12.5。在此工艺条件下,癞葡萄皂甙得率可达2.45%。用正丁醇萃取对粗皂甙进行进一步纯化。通过对五种大孔吸附树脂吸附率和解吸率的测定,筛选出AB-8树脂对癞葡萄皂甙有较好的吸附率和较高的解吸率,是适合分离癞葡萄皂甙的树脂。通过进一步对AB-8树脂的动态吸附特性的研究,结果显示60%的乙醇洗脱量最大,癞葡萄皂甙纯度达到86.00%。以血糖值为评价指标,小鼠为动物模型,对癞葡萄皂甙的降血糖作用进行了研究。结果表明,粗皂甙对正常小鼠没有不良影响,对四氧嘧啶糖尿病小鼠的降血糖作用非常显著;通过不同剂量癞葡萄皂甙对小鼠降糖效果的影响试验可知,低、中剂量组(生药剂量分别为100mg/kg、200mg/kg)具有更好的降糖效果。通过糖耐量试验可知,癞葡萄皂甙对四氧嘧啶糖尿病小鼠的糖耐量具有显著的增强作用。
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