【摘 要】
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目的： 通过建立微量血检测细胞因子分泌细胞的方法，动态观测正常婴儿Th1/Th2平衡的发育及益生菌对其的影响，并探讨益生菌在婴儿湿疹治疗中的应用及其作用机制。 方法：
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目的：
通过建立微量血检测细胞因子分泌细胞的方法，动态观测正常婴儿Th1/Th2平衡的发育及益生菌对其的影响，并探讨益生菌在婴儿湿疹治疗中的应用及其作用机制。
方法：
建立ELISpot方法检测微量血中IFN γ，IL4分泌细胞的方法，观测了60例健康婴儿Th1/Th2平衡随发育的变化，以及含益生菌奶粉的影响。同时采用荧光定量PCR技术测定细菌16SRNA方法，对肠道双歧杆菌，乳酸杆菌，大肠杆菌进行定量检测。对60例湿疹患儿采用了双歧杆菌，乳酸杆菌，粪链球菌三联活菌治疗，并观测了Th1/Th2平衡及肠道菌群变化。
结果：
1．微量指尖血检测细胞因子分泌细胞方法与传统静脉血方法相比，结果无显著性差异，且呈极显著正相关。
2．婴儿随生长发育IFN γ水平逐渐升高，而IL-4的水平逐渐下降，IFN γ/IL4的比值显著增加，11月龄与4月龄相比P<0.05；益生菌奶粉喂养婴儿这种变化趋势更加明显，IFN γ/IL4比值明显上升，在7月龄和11月龄时都显著高于同年龄普通奶粉组(P<0.05～P<0.01)。
3．益生菌奶粉增加婴儿肠道双歧杆菌和乳酸杆菌数量，双歧杆菌和大肠杆菌的比值(B/E)升高与IFNγ/IL4比值增加呈显著正相关。
4．湿疹患儿IL4水平明显高于正常婴儿，在益生菌治疗30天后，IL-4分泌细胞明显减少，IFN γ/IL4比值明显升高，且肠道双歧杆菌和乳酸杆菌也明显升高(P<0.01)。
结论：
1. 微量指尖血可以取代静脉血采用ELIspot方法进行细胞因子观测。
2. 婴儿期Th1免疫应答发育迅速，Th1/Th2比值显著升高，益生菌对Th1发育有促进作用。
3．湿疹患儿存在Th2偏移，益生菌可能通过调节湿疹患儿肠道菌群，影响机体Th1/Th2平衡状态，从而改善症状疗效。
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