【摘 要】
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Absidia sp.R菌是从酒曲中分离得到的一种霉菌,该菌在适宜条件下能够产生高活性的大豆异黄酮糖苷水解酶。本文围绕大豆异黄酮糖苷水解酶的分离纯化以及理化性质等展开系列研究
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Absidia sp.R菌是从酒曲中分离得到的一种霉菌,该菌在适宜条件下能够产生高活性的大豆异黄酮糖苷水解酶。本文围绕大豆异黄酮糖苷水解酶的分离纯化以及理化性质等展开系列研究。大豆异黄酮糖苷水解酶经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Cellocuse(DE-52)离子交换凝胶层析对发酵液进行了分离和纯化,并得到了电泳纯的酶。该酶被纯化了11倍,收率为10.9%;该酶的最适反应温度为50℃;最适pH为5.0;温度在60℃以下、pH为5.0-7.0范围内该酶较稳定,超过此范围,酶活力明显降低;Co2+对该酶有激活作用;Ag+、Cu2+对该酶有抑制作用;经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得该酶的分子量为53kD。等电聚焦电泳测得大豆异黄酮糖苷水解酶等电点为3.2;以染料木甙为底物,pH为5.0,反应温度为50℃时的米氏常数(Km)为12.89mmol/L。该酶在水解底物的特性上不同于传统的β-葡萄糖苷酶(EC3.2.1.21),用大豆异黄酮糖苷酶将提取的大豆异黄酮进行酶解,得到游离型的苷元。此酶的获得以及对其性质的研究对今后开发富含大豆异黄酮甙元的保健食品具有重要的意义和参考价值。
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