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丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)感染可导致慢性肝炎、肝硬化以至肝癌，是威胁人类健康的重大病原体。研制抗HCV疫苗是当前重要而且紧迫的任务。多种证据表明，HCV被膜蛋白E1(aa 192-383)和E2(384-746)在HCV感染靶细胞的过程中可能发挥了重要而且关键的作用，因此成为HCV疫苗研制的主要靶分子。基于被膜蛋白的HCV疫苗研究急需解决抗原检测和疫苗接种后的免疫反应评价的问题，需要首先得到大量高纯度的被膜蛋白抗原及其相应抗体或抗血清。为此，在大肠杆菌系统中进行了1b亚型HCV被膜蛋白表达和纯化的研究。采用6xHis融合表达体系，在大肠杆菌中实现了E2 aa 385-565、aa 450-565、aa 567-730和aa 385-730四个片段的高表达，并获得了高度纯化的产物。在免疫印迹检测中，上述片段与丙型肝炎病人血清有特异性反应，表明大肠杆菌系统表达的E2蛋白携带有HCV E2特异的、不依赖于糖化和立体构象的抗原决定簇。利用aa 385-730片段，建立了病人血清中抗E2抗体的ELISA检测体系，该体系在56%的丙型肝炎病人血清内检出了抗E2抗体，并且发现抗E2抗体的存在与HCV病毒血症存在正相关。利用aa 385-565片段，建立了E2疫苗免疫后抗体反应的ELISA评价体系，并已成功用于重组痘苗病毒疫苗和DNA疫苗的研究。利用aa 450-565和aa 385-730两片段免疫家兔，获得了可识别大肠杆菌和哺乳动物细胞表达之E2蛋白的多抗血清，并且在某些亚型之间具有一定程度的交叉反应性。采用6xHis融合表达体系，在大肠杆菌中实现了E1 aa 192-340和aa 192-326两个片段的高表达，并获得了高度纯化的产物。利用aa 192-326免疫家兔，获得了可识别大肠杆菌和哺乳动物细胞表达之E1蛋白的多抗血清，表明大肠杆菌系统表达的E1蛋白携带有HCV E1特异的、不依赖于糖化和立体构象的抗原决定簇。通过以上工作，得到了大量、高纯的被膜蛋白抗原和被膜蛋白特异的抗血清，建立了被膜蛋白抗原、抗体的检测体系。同时，在表达被膜蛋白的过程中，对E1和E2在大肠杆菌中的表达规律作了一些有益的探索。