紫花苜蓿苹果酸转运体基因的克隆和表达模式研究

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小麦苹果酸转运体(TaALMT1)是第一个被鉴定出来的耐铝基因,该基因已被证实与小麦耐铝机制相关。本研究利用同源比对的方法设计引物,克隆TaALMT1在紫花苜蓿中的同源基因MsALMT1,并对MsALMT1的表达模式进行了初步的探索。MsALMT1的cDNA全长1347bp,编码一个448氨基酸的蛋白,预测该蛋白为一个含6个跨膜结构域的膜蛋白。蛋白氨基酸序列结构与已鉴定的TaALMT1非常类似。MsALMT1蛋白与小麦TaALMT1蛋白有40%的同源性,与拟南芥中的AtALMT1有46%的同源性。对基因MsALMT1表达的组织特异性进行考察,发现该基因在根尖和成熟根区组成性表达,在叶和茎中没有检测到表达。此外,基因的表达分别响应于铝和质子胁迫的诱导,增加胁迫剂量基因的表达有上调趋势。基因对铝胁迫的敏感性高于质子胁迫。相同的铝处理条件下,基因在铝敏感紫花苜蓿品种“中苜一号”中的总体表达水平要高于耐铝品种“阿波罗”。除了铝离子,镉和铜离子也能诱导MsALMT1的表达,因此MsALMT1并非特异性响应于铝的诱导。增加胁迫剂量,基因表达总体呈上调趋势。这些结果表明MsALMT1是一个铝激活基因,它可能参与部分耐铝机制或者重金属胁迫损伤引发的植物响应机制。
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